Liraglutid por CAS 204656-20-2

Liraglutidpor, C172H265N43O51 molekuláris képlet, CAS 204656-20-2, 1209,40 molekulatömeg. Ez egy mesterségesen szintetizált acilezett humán glükagon, mint a peptid-1 (GLP-1) analóg, több mint 97% -os szekvencia-hasonlósággal, mint a természetes GLP-1-hez képest. Feloldható vízben, etanolban és propilénglikolban. A természetes GLP-1 molekula 34. lizin helyzetét az arginin váltja fel, amely nemcsak megőrzi és meghosszabbítja az acilációs termékek és a fehérjék közötti kötődési időt, hanem szignifikánsan legyőzi a GLP könnyű lebomlásának hátrányait is. Normál tárolási körülmények között jó stabilitást mutat, és vizes oldata legalább 2 évig fenntarthatja a fizikai és kémiai stabilitást.

Genetikai toxicitás: Az Ames -teszt eredményeiLiraglutidpor, a humán perifériás vér limfociták kromoszómális aberrációs tesztje és a patkány mikronukleusz tesztje mind negatív volt.

Reproduktív toxicitás:

Az 1. hím patkányokat szubkután injektáltuk 0,1, 0,25 és 1,0 mg/d/d liraglutiddal 4 héttel a párzás előtt és a párzás során. 1,0 mg/kg/nap adagban a férfi állati termékenységet nem befolyásolta közvetlenül. A Plazma AUC számításai szerint az e dózis által generált szisztémás expozíció körülbelül 11 -szerese volt az emberi expozíciónak az ajánlott humán dózison (MRHD). Az 1,0 mg/kg szubkután befecskendezése nőstény patkányokba fokozta a korai embrionális halált, a látható súlygyarapodást és az élelmiszer -bevitel csökkentését.

2, a párosodás előtti 2 héttől a terhesség 17. napjáig nőstény patkányokban, 0,1, 0,25 és 1,0 mg/kg/d liraglutid szubkután injekciókat adtak be. A Plazma AUC számításai szerint a három adag által generált szisztémás expozíció körülbelül 0,8, 3 és 11 -szerese volt az MRHD szerinti humán expozíciónak. Az 1 mg/kg/napos csoportban a korai embrionális halálesetek száma enyhe növekedést mutatott. Minden adagban a magzati rendellenességeket, a vese- és érrendszeri variációkat, a koponya szabálytalan csontosodását és a túlzott csontok teljes állapotát figyelték meg. 1,0 mg/kg/nap adagban foltos májat és enyhe bordázást figyeltünk meg. A magzati rendellenességek előfordulása, amely meghaladja az azonos időszakot és a történelmi kontrollot, a következők: oropharyngealis rendellenességek és/vagy stenosis a toroknyíláson 01 mg/kg/nap dózisban, és köldökhibákban 0,1 és 0,25 mg/kg/nap dózisokban.

A terhesség 6. és 18. napján a nyulakat szubkután injektáltuk liraglutiddal 0,01, 0,025 és 0,05 mg/d/d koncentrációban. A plazma AUC számításai szerint a terhes nyulak szisztémás expozíciója alacsonyabb volt, mint az embereknél az MRHD során. Minden adagban a magzati súly csökkent, és a súlyos magzati rendellenességek általános előfordulása dózisfüggő módon növekedett. At doses of 0.01mg/kg/d (kidney, shoulder and spleen bones),>=0.01mg/kg/d (eyes and forelimbs), 0.025mg/kg/d (brain, tail and vertebrae, large blood vessels and heart, umbilical cord),>=0.025mg/kg/d (sternum), and 0,05 mg/kg/nap (parietális csont és nagy erek), a rendellenességek előfordulása meghaladta a kortárs és a történelmi kontrollok gyakoriságát. A koponyában, a csigolyákban és a bordákban, a szegycsont, a medence, a coccyx, valamint a váll és a lépcsontokban szabálytalan csontosodás és/vagy csontváz rendellenességek találhatók; Van egy kis dózisfüggő csontvázas variáció is. A zsigeri rendellenességeket az erekben, a tüdőben, a májban és a nyelőcsőben találják meg. Az összes kezelési csoport kettős lebenyt vagy az epehólyag elõvítését mutatta, de a kontrollcsoportban nem figyeltek meg hasonló helyzetet.

4. A terhesség 6. napjától az elválasztásig vagy a szoptatásnak a 24. napon történő felmondásáig tartó időszakban a nőstény patkányokat szubkután injektáltuk 0,1, 0,25 és 1,0 mg/kg/d liraglutiddal. A plazma AUC számításai szerint a szisztémás expozíció körülbelül 0,8, 3 és 11 -szerese volt az emberi expozíciónak az MRHD alatt. A kezelőcsoportban a legtöbb állat beadási periódusa kissé késett. Az újszülöttek átlagos tömege a kezelési csoportban alacsonyabb volt, mint a kontrollcsoportban. A nőstény patkányok az 1,0 mg/kg/nap dóziscsoportban vérveszteséget és izgalom viselkedését mutatták be a szülés során. Az F2 utódok átlagos testtömege a kezelési csoportban a születéstől a születés utáni 14. napig alacsonyabb volt, mint a kontrollcsoportnál, de a csoportok közötti különbségek nem értek el statisztikai szignifikanciát.

Liraglutidporegy mesterségesen szintetizált acilezett humán glükagon, mint a peptid-1 (GLP-1) analóg, több mint 97% -os szekvencia-hasonlósággal, mint a természetes GLP-1-hez képest. A liraglutid molekuláris szerkezete magában foglalja a következő fő jellemzőket: a természetes GLP-1 molekula 34. lizin helyzetét az arginin helyettesíti, amely nemcsak megőrzi és meghosszabbítja az acilációs termékek és a fehérjék közötti kötődési időt, hanem jelentősen túlsúlyozza a GLP könnyű lebomlásának hátrányát; További zsírsav-oldalláncot adtak a 26. lizinhez, amely elősegíti az acilációs termékek felezési idejének meghosszabbítását in vivo. Ezek az egyedi molekuláris változások miatt a delilaglutid kiemelkedő hatást mutat a klinikai kezelésre, különösen a cukorbetegségben és a fogyásban.

A liraglutid szintetizálására szolgáló kémiai módszerek elsősorban a következő lépéseket tartalmazzák:

1. Fragment szintézis

Először ossza meg a teljes liraglutidot több szegmensre, amelyek általában öt szegmensre oszlanak: 1. és 4. aminosavak, az 5. -10 -es aminosavak, a 11. és a 16. aminosav, a 17. és 24. aminosavak és a 25. és a 31. aminosav. Mindegyik fragmentumot külön -külön szintetizálják, ami csökkentheti a peptid szintézis nehézségeit és költségeit, és javíthatja a szintézis hatékonyságát.

Az egyes fragmensek szintéziséhez általában szilárd fázisú szintézis vagy folyadékfázisú szintézis módszereket alkalmaznak. A szilárd fázisú szintézis módszer magában foglalja az aminosavak karboxilcsoportjainak összekapcsolását a gyantával, majd egymást követően az aminosavak hozzáadásával a gyanta sorrendben, és végül levágja a peptideket a gyantából. A folyadékfázisú szintézis módszer magában foglalja az összes aminosav feloldását egy szerves oldószerben, majd egymás utáni kondenzálással, hogy peptidfragmenseket képezzen.

2. Kapcsolási reakció

Végezzen kapcsolási reakciót az 1. lépésben szintetizált 5 peptidfragmentumon, hogy teljes liraglutidot képezzen. A kapcsolási reakciót kémiai vagy biológiai kapcsolószerek felhasználásával lehet végrehajtani, és a specifikus módszert a tényleges igények szerint választhatjuk meg.

A kapcsolási reakcióban az egyes fragmentumok amino -csoportjának összekapcsolása a következő fragmentum karboxilcsoportjával. Ennek elérése érdekében általában kondenzációs szereket, például DIC -t vagy BOP -t kell használni. Ezek a kondenzációs szerek elősegíthetik az amino és a karboxilcsoportok közötti reakciót, peptidkötéseket képezve. A kapcsolási reakció során figyelmet kell fordítani a reakció körülmények, például a hőmérséklet, a pH -érték és a reakcióidő szabályozására is a reakció zökkenőmentes előrehaladásának biztosítása érdekében.

3. Tisztítás és azonosítás

A szintetizált liraglutidot tisztítani és azonosítani kell a termék tisztaságának és minőségének biztosítása érdekében. A tisztítást általában olyan módszerekkel hajtják végre, mint például a nagy teljesítményű folyadékkromatográfia (HPLC) vagy az elektroforézis, amelyet tömegspektrometriával, nukleáris mágneses rezonanciával és más módszerekkel történő azonosítással végeznek. Ezen eszközök révén biztosítható, hogy a szintetizált termék molekulatömege és sorrendje összhangban álljon a várakozásokkal, és nincsenek szennyeződések vagy melléktermékek maradványai.

4. Egyéb módosítások

A fenti lépések mellett néha más módosításokra van szükség, például a védőcsoportok hozzáadása vagy eltávolítása. Ezek a lépések szintén nélkülözhetetlenek, mivel megvédhetik a peptidek aktív csoportjait a megsemmisüléstől vagy az oldalsó reakcióktól, javítva a szintetizált minőséget és hozamotLiraglutidpor.

A fentiek a fő kémiai módszerek a liraglutid szintetizálására, de természetesen néhány részletet és technikát meg kell jegyezni a gyakorlati működés során. Például a megfelelő oldószerrendszer kiválasztása, a hőmérséklet és a pH szabályozása, valamint a megfelelő katalizátorok használata mind befolyásolhatja a szintézis hatékonyságát és a termékminőséget. Ezért a gyakorlati működés során a kiigazításokat és az optimalizálásokat meghatározott körülmények szerint kell elvégezni.

A liraglutid (egy hosszú hatású GLP-1 receptor agonista) jelentős szerepet játszik a cukorbetegség kezelésében. A minőségi ellenőrzhetőség biztosítása érdekében tudományos és szigorú analitikai módszereket kell létrehozni, és szisztematikus validálást kell végezni ezen módszerek megbízhatóságának biztosítása érdekében. A következő elemzést három szempontból végezzük: validálási tételek, validációs módszerek és a kulcsvezérlő pontok.

Alapvető ellenőrzési tételek és műszaki követelmények

Sajátosság

Cél: Annak igazolása, hogy a módszer megkülönbözteti a liraglutidot a szennyeződésektől, a degradációs termékektől és a segédanyagoktól.

Végrehajtási stratégia:

Kromatográfia: Használjon HPLC-UV vagy UPLC-MS-t. Kényszerített lebomlási tesztek (például magas hőmérséklet, fény expozíció, sav-bázis hidrolízis) révén generálnak degradációs termékeket és ellenőrizzük a fő csúcs és a szennyeződés csúcsának elválasztási fokát (nagyobb vagy egyenlő 1,5). Például az APOE-/- egérmodell vizsgálatában a liraglutid oxidálódása után a degradációs termékeket (például a formid sav-adduktumokat) kromatográfiás elemzéssel kell megerősíteni, hogy biztosítsák a degradációs termékek elválasztását a fő csúcstól.

Spektroszkópia: Használjon PDA -detektorot a fő csúcs és szennyeződések UV -spektrumainak összehasonlításához, és megerősítse a csúcsok tisztaságát.

Üres vezérlés: Ellenőrizze a hamis pozitív jelek hiányát a liraglutid nélküli minták felhasználásával (például a segédanyag -oldatok).

 

Pontosság

Cél: Annak biztosítása érdekében, hogy a mért eredmények közel álljanak a valódi értékhez, és a helyreállítási sebességet 98% - 102% -on belül szabályozzák.

Végrehajtási stratégia:

Szabványos kiegészítés -helyreállítási teszt: Adjon hozzá egy ismert referenciaanyagot egy ismert liraglutid -tartalommal rendelkező mintához, és mérje meg a helyreállítási sebességet. Például a készítmény elemzéséhez adjon hozzá 0,5 mg/ml, 1,0 mg/ml és 1,5 mg/ml liraglutidot az üres segédanyag -oldathoz, ismételje meg az egyes koncentrációkat háromszor, és számolja ki az átlagos visszanyerési sebességet.

Összehasonlító módszer: Összehasonlítsuk a klasszikus módszerekkel (például a titrálás) vagy az ellenőrzött módszerekkel (például a farmakopóia módszerekkel), és az eredmény eltérésének 2%-nál kisebb vagy egyenlőnek kell lennie.

 

Pontosság

Cél: Az ismételt mérési eredmények közelségének értékelése, az RSD kisebb vagy 2%-kal.

Végrehajtási stratégia:

Megismételhetőség: Végezzen el ugyanazon mintának 6 egymást követő mérését ugyanazon elemzővel, ugyanazt a műszert és ugyanazt a mintákat, és számolja ki az RSD -t.

Középpontos pontosság: Számítsa ki az RSD -t úgy, hogy meghatározza ugyanazt a minták tételét különböző elemzők, különböző műszerek és különböző dátumok alapján. Például a liraglutid -tartalom meghatározásakor az RSD megismételhetőségének 1,5%-nál kisebb vagy egyenlőnek kell lennie, és a közbenső pontosságú RSD -nek kevesebb vagy egyenlőnek kell lennie 2,0%-nak.

Reprodukálhatóság: Több laboratórium (például a Pharmacopoeia Standard Methods) együttműködési ellenőrzése, az RSD -nek meg kell felelnie az iránymutatásoknak.

 

Észlelési határ és mennyiségi meghatározási határ

Cél: Annak meghatározása, hogy a módszer képes kimutatni és számszerűsíteni a liraglutidot.

Végrehajtási stratégia:

Jel-zaj arány módszer: Határozza meg a LOD-t 3: 1 jel-zaj arányban, és határozza meg a LOQ-t 10: 1 jel-zaj arányban. Például a HPLC-UV módszernél a liraglutid LOD-értéke akár 0,01 ug/ml lehet, és a LOQ 0,05 ug/ml.

Szabványos görbe módszer: Számítsa ki a LOD-t és az LOQ-t az alacsony koncentrációs standard anyagok válaszjeleivel (például 0,1 ug/ml - 1 UG/ml).

 

Linearitás

Cél: Annak igazolása, hogy a válaszjel arányos a koncentrációval, az R² -nél nagyobb vagy egyenlő 0,999.

Végrehajtási stratégia:

Gradiens koncentráció-teszt: Készítsen 5-7 koncentrációs gradienseket (például 0,1 mg/ml - 2.0 mg/ml) standard oldatokból, mérje meg a csúcsterületet vagy a válaszértéket, és rajzolja meg a standard görbét.

A maradék elemzés: Ellenőrizze, hogy a maradványok véletlenszerűen oszlanak -e el, és nincs szisztematikus eltérés.

 

Hatótávolság

Cél: A módszer alkalmazandó koncentrációs tartományának meghatározása, általában a LOQ 120% -a a linearitás felső határáig.

Végrehajtási stratégia:

Tartalom meghatározása: A tartományt a címkézett mennyiség 80% -ánál kell beállítani. Például a liraglutid készítmény tartalmi meghatározási tartományának 0,4 mg/ml -nek kell lennie - 1.2 mg/ml. Szennyeződés -ellenőrzés: Az ICH Q3D iránymutatása szerint állítsa be a szennyeződések határtartományát (pl. Az egyetlen szennyeződés, amely kevesebb vagy 0,5%, a teljes szennyeződésnél kevesebb vagy 2,0%).

Érvényesítési dokumentumok és adatkezelés

01

Érvényesítési terv és jelentés

Világosan határozza meg az érvényesítési tételeket, módszereket, elfogadási szabványokat és rendellenes kezelési eljárásokat. Például, ha a precíziós RSD meghaladja a határértéket, akkor meg kell vizsgálni a műszeres hibákat vagy az operatív hibákat.

A nyomon követhetőség biztosítása érdekében rögzítse az eredeti adatokat (például a kromatogramok, a standard görbék, a visszanyerési sebesség számítási táblázatait).

02

Stabilitási jelzési módszer fejlesztése

A kötelező lebomlási tesztekhez az oxidációt, a fény expozícióját, a hidrolízist stb., A tényleges tárolási körülmények szimulálásához. Például, a liraglutid, amelyet 60 fokos 48 órán keresztül helyeznek el, a degradációs sebességnek nagyobb vagy 10% -osnak kell lennie, hogy ellenőrizze a módszer képességét a degradációs termékek észlelésére.

03

Szabályozási megfelelés

Kövesse az ICH Q2 (R2), USP -t<1225>, és a kínai GMP iránymutatások annak biztosítása érdekében, hogy az érvényesítési tételek magukban foglalják az alapvető mutatókat, például a specifitást és a pontosságot.

Az elemi szennyeződés elemzéséhez meg kell felelnie az ICH Q3D -nek és az USP -nek<233>Követelmények, az 1 osztályú elemek, például a CD és a PB határainak ellenőrzése.

Népszerű tags: Liraglutide por CAS 204656-20-2, Szállítók, gyártók, gyár, nagykereskedelem, vétel, ár, ömlesztett, eladó