3XFLAG peptid CAS 402750-12-3

1. Affinitás tisztítás:

Használható fehérjetisztítás címkéjeként, és az anti FLAG antitestekkel szembeni nagy affinitása révén a célfehérje könnyen tisztítható. Általában a célfehérjét 3X FLAG-PEPTIDET tartalmazó expressziós vektorral együtt transzfektálják a sejtekbe, majd affinitással tisztítják anti FLAG antitestek felhasználásával, hogy gyorsan és hatékonyan kapjanak nagy tisztaságú célfehérjét.

2. Immunológiai vizsgálat:

Magas immunogenitása miatt fehérje expresszió és lokalizáció kimutatására használható. Specifikus anti-FLAG antitestek alkalmazásával kísérleti technikák, például immunblot és immunfluoreszcens festés végezhetők a célfehérjék expressziós szintjének és eloszlásának gyors és pontos kimutatására.

3. Klónszűrés:

Fehérje klón szűrés kényelmére is használható. A fehérje expressziós vektorok építési folyamatában a célfehérje génszekvenciájának összekapcsolása a 3XFLAG szekvenciával elősegítheti a pozitív klónok szűrését a célfehérjével immundetektálási és egyéb módszerekkel, ezzel is felgyorsítva a fehérjefunkciók kutatásának folyamatát.

4. Immunprecipitáció:

Fehérje immunprecipitációs kísérletekhez is használható. A 3X FLAG PEPTIDE címkéket tartalmazó fehérjék anti FLAG antitestekhez kötésével, majd adszorpciós anyagok, például protein A/G agaróz vagy mágneses gyöngyök használatával a célfehérje és kölcsönható partnerei szelektíven kicsaphatók a sejtkivonatokból a fehérje kölcsönhatási hálózat tanulmányozásához.

Az immunogenitás egy anyag azon képességére utal, hogy stimulálja a szervezet immunrendszerét immunválasz kiváltására. Az XFLAG-ot, mint exogén peptidszegmenst, a szervezet immunrendszere „nem saját” komponensként ismerheti fel, ezáltal immunválaszt vált ki. Bár a 3XFLAG szekvencia viszonylag rövid, bizonyos esetekben még mindig aktiválhatja a B-sejteket és a T-sejteket, ami antitestek termeléséhez vezet. Ezek az antitestek nem csak a szabad 3XFLAG-hoz kötődnek, hanem a 3XFLAG címkét expresszáló fúziós fehérjéket is felismerhetik és azokhoz kötődhetnek, befolyásolva a fúziós fehérje normál működését és eloszlását.

Az allergiás reakció egy abnormális immunválasz, amelyet az immunrendszer bizonyos allergénekre való túlérzékenysége okoz. Egyénenként allergiás reakciók léphetnek fel, amikor a 3XFLAG-ot kísérletezésre vagy kezelésre használják. Az allergiás reakciók tüneteinek súlyossága változó. Az enyhe esetek helyi tünetekkel, például viszketéssel, bőrkiütéssel és bőrpírral jelentkezhetnek, míg súlyos esetekben szisztémás allergiás reakciókat, például anafilaxiás sokkot válthatnak ki, amelyet erős vérnyomásesés, légzési nehézség és eszméletvesztés jellemez, ami komoly veszélyt jelent az életbiztonságra.

Az allergiás reakciók mechanizmusa főként az immunrendszerben lévő IgE antitestekkel kapcsolatos. Amikor a szervezet először érintkezik a 3XFLAG-gal, az immunrendszer allergénként ismeri fel, és specifikus IgE antitestek termelésére serkenti a B-sejteket. Ezek az IgE antitestek a hízósejtek és az eozinofilek felszínéhez kötődnek. Amikor a szervezet ismét érintkezésbe kerül a 3XFLAG-gal, az a sejtfelszínen lévő IgE antitestekhez kötődik, és a hízósejteket és az eozinofileket aktiválva bioaktív mediátorokat, például hisztamint és leukotriéneket szabadít fel, ami allergiás tünetek kialakulásához vezet.

A 3XFLAG hosszú távú vagy ismételt expozíciója növelheti az autoimmun betegségek kialakulásának kockázatát. Az autoimmun betegségek olyan betegségekre utalnak, amelyekben a szervezet immunrendszere tévedésből megtámadja saját szöveteit és szerveit, ami szövetkárosodást és funkcionális károsodást okoz. 3Az XFLAG molekuláris szimulációs mechanizmussal keresztreaktív antitestek és T-sejtek termelésére késztetheti az immunrendszert, ahol az aminosavszekvenciája hasonló magának a testben lévő bizonyos fehérjéknek a szekvenciájához.

elektrosztatikus kölcsönhatások révén kötődhet a sejtmembrán pozitív töltésű komponenseihez, megváltoztatva a sejtmembrán permeabilitását és fluiditását, ami intracelluláris anyagok kiszivárgásához vagy káros anyagok kívülről való bejutásához vezethet, ezáltal befolyásolva a sejt normál élettani funkcióit. Ezenkívül a 3XFLAG a sejtek belsejébe is bejuthat, megzavarhatja a jelátviteli útvonalakat, a fehérjeszintézist és más folyamatokat, tovább súlyosbítva a sejtkárosodást.

A 3XFLAG zavarhatja az intracelluláris jelátviteli útvonalakat, és befolyásolhatja a sejtek normál fiziológiai aktivitását. A celluláris jelátviteli útvonal olyan molekuláris események sorozatának gyűjtőfogalma, amelyek során a sejtek külső ingerekre reagálnak, és olyan fontos folyamatokat szabályoznak, mint a sejtnövekedés, a differenciálódás és az apoptózis.{2}}Az XFLAG megzavarhatja a jelátviteli útvonalak normál átvitelét azáltal, hogy kölcsönhatásba lép a jelátviteli útvonal kulcsmolekuláival, megváltoztatva a jelátvitel aktivitását vagy expressziós szintjét.

Például kötődhet a sejtfelszínen lévő receptorokhoz, kompetitív módon gátolva a természetes ligandumok kötődését a receptorokhoz és blokkolva a jelátvitelt; Alternatív megoldásként bejuthat a sejtbe, és kötődhet a jelátviteli fehérjékhez, befolyásolva a fehérje foszforilációját, defoszforilációját és más módosítási folyamatokat, megzavarva a jelátvitelt és az amplifikációt. A celluláris jelátviteli útvonalakkal való ilyen interferencia sejtműködési zavarokhoz vezethet, olyan folyamatokat befolyásolva, mint a sejtproliferáció, differenciálódás és apoptózis, ami viszont káros hatással lehet a szövetek és szervek normális fejlődésére és működésére.

A sejtmetabolizmus a sejten belül lezajló kémiai reakciók sorozatának általános kifejezése, amelyek energiát és anyagi alapot biztosítanak a sejtek élettevékenységéhez{0}}Az XFLAG befolyásolhatja a sejtek anyagcsere-folyamatait, megzavarhatja a sejtek energiatermelését és anyagszintézisét. Például befolyásolhatja a mitokondriumok működését, amelyek a sejtek aerob légzésének és energiatermelésének fő helyszínei. 3Az XFLAG megváltoztathatja a mitokondriális membrán permeabilitását és potenciálját azáltal, hogy kölcsönhatásba lép a membránon lévő fehérjékkel vagy lipidekkel, befolyásolva a mitokondriális légzési lánc működését és az ATP szintézisét,

ami a sejtek elégtelen energiaellátásához vezet. Ezen kívül3XFLAG peptidzavarhatja az intracelluláris folyamatokat is, például a glükóz- és lipid-anyagcserét, befolyásolva a sejtek anyagszintézisének és lebomlásának egyensúlyát, és negatív hatással lehet a sejtek normális élettani funkcióira.