Proteináz K por CAS 39450-01-6

A Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. a cas 39450-01-6 proteináz k por egyik legtapasztaltabb gyártója és szállítója Kínában. Üdvözöljük a nagykereskedelmi ömlesztett, kiváló minőségű proteináz k por cas 39450-01-6 értékesítésében itt, gyárunkból. Jó szolgáltatás és elfogadható ár érhető el.

Proteináz K poregy rendkívül hatékony, nem -specifikus szerin proteáz, amelyet széles körben használnak a molekuláris biológiában és biokémiában, elsősorban fehérjék lebontására és a szennyező fehérjék eltávolítására a nukleinsavkészítményekből. Az Engyodontium album (korábban Tritirachium album) gombából származik, és széles hőmérséklet-tartományban (20-60 fok) és pH-n (4-12) megőrzi aktivitását, még akkor is, ha SDS-t (0,5-1%) vagy karbamidot (4M) tartalmazó oldatban inkubálják denaturáló körülmények között.

Az enzim hatékonyan lebontja a fehérjék széles skáláját, beleértve az RNázt és a DNázt is, a peptidkötések elszakításával (előnyösen az alifás/aromás aminosavak karboxil-terminálisának hidrolizálásával), ezért a DNS/RNS extrakció során a nukleázok eltávolítására használják a nukleinsavak integritásának biztosítása érdekében. Ezenkívül gyakran használják szövetemésztésre (pl. paraffin-beágyazott minták), sejtlízis és proteomikai vizsgálatok során.

A Proteinase K port általában liofilizált formában szállítják, amely nagyon stabil (-20 fok hosszú távú tároláshoz), és használat előtt pufferben (pl. Tris-HCl, EDTA) fel kell oldani. Aktivitása a Ca2+-tól függ, de a kelátképző szerek, mint például az EDTA, csak részben gátolják az enzimaktivitást. A kezelés során kerülni kell az önlebomlást, és 65 fokos hőinaktiválás javasolt. Erőteljes fehérjehidrolizáló képessége miatt gondos védelem szükséges a bőrrel vagy a nyálkahártyával való érintkezés elkerülése érdekében.

Proteináz k por, más néven Proteinase K vagy EC 3.4.21.14, a Tritirachium album Limberből izolált és tisztított szerin proteáz. Wolfgang Ebeling és munkatársai első izolálása óta. 1974-ben a proteináz K-t széles körben használták a biokémiában, a molekuláris biológiában, az orvostudományban és az iparban magas aktivitása és széles szubsztrátspecifitása miatt.

A DNS és RNS extrakció során a proteináz K fő funkciója a nukleinsavakhoz kötött fehérjék lebontása, lehetővé téve, hogy a DNS vagy RNS szabadon maradjon oldatban a későbbi extrakció és tisztítás céljából. A denaturálószerekben, például karbamidban és SDS-ben mutatott stabilitása és nagy aktivitása miatt a proteináz K-t általában plazmidok vagy genomiális DNS és RNS izolálására használják.

A proteináz K gátolhatja az RNS-áz aktivitását és megvédheti az RNS-t a lebomlással szemben.

1. DNS és RNS extrakció

 

DNS-kivonás: A proteáz K képes hidrolizálni a DNS-hez kötődő hisztonokat, lehetővé téve a DNS disszociációját az oldatban. Ezt követően a szennyeződéseket különböző módszerekkel eltávolítottuk, például fenolos kloroformos extrakcióval, etanolos kicsapással stb., és a tisztított DNS-t összegyűjtöttük.
RNS-kivonás: Az RNS-kivonási folyamat során az RNS-enzimek általában jelen vannak a környezetben, és maga a mintarendszer is tartalmazhat RNS-enzimeket, így az RNS nagyon érzékeny a lebomlásra. Kis mennyiség hozzáadásával

2. In situ hibridizációs technológia

 

Az in situ hibridizációs technológiát a proteináz K-t általában a hibridizáció előtti feldolgozásra használják a cél-DNS-t körülvevő fehérjék megemésztésére, növelve a próba célnukleinsavhoz való kötődésének esélyét, és fokozzák a hibridizációs jelet. Figyelembe kell azonban venni, hogy ha a proteináz K koncentrációja túl magas, az emésztési idő túl hosszú, vagy az inkubációs hőmérséklet túl magas, az a sejtszerkezet károsodását okozhatja, ami szöveti metszetek leválásához és a sejtmagok eltűnéséhez vezethet, ami befolyásolja a hibridizációs eredményeket. Ezért a gyakorlati alkalmazásokban szigorúan ellenőrizni kell a proteináz K koncentrációját és kezelési idejét.

3. Vírusinaktiválás és fertőtlenítés

 

A Proteáz K erős proteolitikus aktivitása miatt vírusinaktiválásra és fertőtlenítésre használható. A kutatások kimutatták, hogy a tiszta víz és a háztartási szennyvizek bizonyos koncentrációjú proteináz K-val történő kezelése hatékonyan inaktiválhatja a vírusokat. A Proteáz K, mint vírusinaktiváló fertőtlenítő szer, csökkentheti a hagyományos oxidatív kémiai fertőtlenítőszerek emberi szervezetre gyakorolt ​​lehetséges ártalmait, előállítása és szállítása biztonságos, visszafordíthatatlan környezetszennyezés nélkül.

4. Western blot és impulzuselektroforézis

 

A proteáz K-t széles körben alkalmazzák kromoszóma-DNS előállításában pulzáló elektroforézishez, Western-blothoz és más kísérletekhez. Western blot kísérletekben a proteináz K használható a nem specifikus fehérjék eltávolítására a mintából, javítva a blot specificitását és érzékenységét. Az impulzuselektroforézises kísérletekben a proteináz K képes lebontani a DNS-minták fehérjeszennyeződéseit és javítani az elektroforézis hatékonyságát.

5. Fehérje kimutatása és azonosítása

 

Proteináz k porbizonyos fehérjék kimutatására és azonosítására is használható. Például a transzmissziós szivacsos agyvelőbántalmak (TSE) vizsgálatában a proteináz K felhasználható az agyszövetminták fehérjéinek emésztésére, valamint a prionfehérjék jelenlétének azonosítására a patogén prionok proteináz K-val szembeni rezisztenciájának kimutatásával. Ezen túlmenően, a proteináz K olyan kísérletekhez is használható, mint például az enzimek lokalizációjának meghatározása a sejtmembránokon és a toxinokhoz kötött enzimek sejtmembránokon és a toxinok újramozgatásában. lizozim és ribonukleáz A).

1. Orvosi terület

 

Klinikai felhasználás: A proteáz K bizonyos gyógyászati ​​értékkel bír az orvostudományban. Például emésztési zavarok kezelése gyomorproteázzal, hörghurut savas proteázzal, vasculitis kezelése elasztázzal stb. Ezen túlmenően a tripszin, kimotripszin stb. gyakran használatos sebészeti gennyes sebek tisztítására és a pleurális szerosalis összenövések kezelésére.
Vírusfelismerés és -diagnosztika: A Protease K-t a vírusfelderítésben és -diagnosztikában is potenciálisan alkalmazzák. A vírusmintában lévő fehérjék megemésztésével és a vírus nukleinsavának feltárásával kényelmesebbé teszi a későbbi nukleinsav-vizsgálatokat.

2. Ipari szektor

 

Bőripar: A Protease K-t a bőriparban használják szőrtelenítésre és lágyító kezelésre, ami időt takaríthat meg és javítja a munkahigiéniai feltételeket.
Textilipar: A proteáz K olyan textiliparban használható, mint például a selyem gyantamentesítése.
Élelmiszeripar: A Protease K az élelmiszeriparban felhasználható hús puhítására, alkoholos derítésre stb.
Mosószer: Az enzimes mosószer egy új termék a mosószerekben. A lúgos proteázt tartalmazó mosószer eltávolíthatja a vérfoltokat és a fehérjeszennyeződést a ruhákról. Használatakor azonban ügyeljen arra, hogy ne érintse meg a bőrt, nehogy károsítsa a bőr felszínén lévő fehérjét, és ne okozzon allergiás reakciókat, például kiütést és ekcémát.

Szerkezeti jellemzők

 

A proteináz K molekulatömege megközelítőleg 28900 dalton (28,9 kDa), és az irodalomban 29,3 kDa-ról is számolnak be. Aminosavszekvenciája és háromdimenziós térszerkezete nagymértékben hasonlít a szerinproteázcsaládba tartozó szubtilizinhez, de van néhány egyedi jellemzője is.

Diszulfid kötés szerkezete: A proteáz K molekulák diszulfid kötéseket tartalmaznak, amelyek növelik stabilitásukat és lehetővé teszik, hogy széles pH-tartományban és magas hőmérsékleti körülmények között is fenntartsák aktivitásukat.
Ca ² ⁺ kötőhelyek:Proteináz k porkét Ca ² ⁺ kötőhelyet tartalmaz, amelyek bár távol vannak az aktív centrumtól, kulcsfontosságúak az enzim katalitikus aktivitásának fenntartásához. A Ca ² ⁺ eltávolítása azt eredményezi, hogy a proteáz K elveszti aktivitásának körülbelül 80%-át, és a Ca ² ⁺ újbóli bevezetése csak részben tudja helyreállítani aktivitását.
Katalitikus triád: A Protease K egy Asp-His69-Ser224 katalitikus triáddal rendelkezik, amely a hidrolitikus aktivitásának kulcsfontosságú szerkezete.

Hatásmechanizmus

 

A Proteáz K elsősorban a hidrofób aminosavak C-terminálisa melletti észter- és peptidkötéseket, kén-tartalmú aminosavakat és aromás aminosavakat képes hidrolizálni, így a fehérjéket rövid peptidekké hidrolizálja. Hatásmechanizmusa főként a következő lépésekből áll:

Enzim szubsztrát kötődés: Miután a proteáz K a szubsztráttal összekeveredik, a szubsztrát az enzim aktív helyéhez kötődik, enzimszubsztrát komplexet képezve.
Katalitikus reakció: Az aktív hely hatására a szubsztrát peptidkötése hidrolizálódik, és az enzimtől elválasztott termék keletkezik.
A proteáz K erős lebontó hatása miatt kulcsreagenssé válik különféle biokémiai reakciókban, különösen a DNS és RNS extrakciós folyamatokban. A proteáz K hatékonyan képes lebontani a nukleinsavakhoz kötött fehérjéket, nukleinsavakat szabadít fel, és gátolja a nukleázok aktivitását, csökkentve a nukleinsavak lebomlását az extrakció során.

Proteináz k por, mint rendkívül aktív és szubsztrátspecifikus szerin proteáz, széles körben alkalmazható a biokémiában, a molekuláris biológiában, az orvostudományban és az iparban. Lebonthatja azokat a fehérjéket, amelyek nukleinsavakhoz kötődnek és nukleinsavakat szabadítanak fel; Növelje a próbák lehetőségét, hogy in situ hibridizációs technológiával kötődjenek a célnukleinsavakhoz; Vírus inaktiválására és fertőtlenítésére használják; Távolítsa el a fehérje szennyeződéseket Western blot és impulzus elektroforézis kísérletekben; Gyógyászati ​​értéke van az orvostudomány területén; Olyan ipari területeken használják, mint a bőrfeldolgozás, a textilipar, az élelmiszeripar és a mosószergyártás. A proteináz K alkalmazása során azonban figyelni kell a tárolási módjára és a felhasználási körülményeire, hogy biztosítva legyen stabilitása és aktivitása.

A proteináz K egy széles-spektrumú szerin proteáz, amelyet egyedülálló enzimatikus tulajdonságai és stabilitása miatt széles körben használnak a molekuláris biológiában, a biokémiában és az orvosi kutatásokban. Fagyasztva{2}}szárított por formájában a Proteinase K Powder kulcsfontosságú szerepet játszik az olyan kísérletekben, mint a nukleinsav-kivonás, a fehérjeemésztés és a szövethomogenizálás. Bármely biológiai reagens használata azonban potenciális kockázatokkal jár, és mellékhatásai a kezelők egészségét és a kísérleti környezet biztonságát is érinthetik.

Népszerű tags: proteináz k por cas 39450-01-6, beszállítók, gyártók, gyár, nagykereskedelem, vétel, ár, ömlesztve, eladó