Agaróz poregy szerves anyag, amelynek kémiai képlete c24h38o19. Ez egy fehér vagy sárga gyöngyszerű gélrészecske vagy por, amely egy lineáris polimer, és az alapszerkezet 1,3-kapcsolt - D-galaktóz és 1,4-kapcsolt 3,6-endoéter-l-galaktóz felváltva kapcsolódik.
Az agar-pektin egy heterogén keverék, amely sok kisebb molekulából áll. Az agarózt általában 90 fok fölé hevítik, hogy vízben oldódjanak, és amikor a hőmérséklet 35-40 fokra csökken, jó félszilárd gélt képez, ami a fő jellemzője és alapja különféle felhasználásainak. Az agaróz gél teljesítményét általában a gél erőssége fejezi ki. Minél nagyobb a gél szilárdsága, annál jobb a teljesítménye.
Agaróz por, rövidítve Ag, az agar töltetlen semleges komponense, amelyet agaróznak vagy agaróznak is fordítanak. Az agaróz kémiai szerkezetét 1,{2}} D-galaktóz és 1,4-kapcsolt 3,6-endoéter-l-galaktóz váltakozva kapcsolja össze.
Az agaróz a vörös algák poliszacharidjából származik, és fő összetevője a poligalaktóz, amelynek körülbelül 70%-a agaróz és 30%-a elágazó láncú agaróz. Az agaróz lineáris szerkezetű, és áthalad rajta a D-galaktóz és a 3,6-dehidratált galaktóz - 1, 4 és - 1, 3 csomópont váltakozva ismétlődő diszacharid egységeket alkot. Az elágazó láncú agarózt a - 1-ből extraháltuk, 3 kötés választ el egy másik láncot. A hínárból forró vízzel kinyert anyag körülbelül 40% agart tartalmaz. A kereskedelemben kapható agar (közismert nevén agar) gyakran lap vagy laza kötél formájú, és általában ehető gumiként, gyógyszercsomagoló anyagként vagy bakteriális táptalajként használják. A tiszta agarózt gyakran használják biokémiai laboratóriumokban félszilárd hordozóként az elektroforézisben, kromatográfiában és más biológiai makromolekulák vagy kis molekulák elválasztására és elemzésére szolgáló technológiákban.
Az agaróz gyártási folyamata négy részre osztható: előkezelés, extrakció, DEAE cellulózkezelés és dehidratálás
1) Az előkezelt porszerű nyersanyagokat közvetlenül 80 C-on 1/2 órán keresztül szárítjuk. a csík- és tömb alapanyagokat vízzel lemossuk, apró darabokra vágjuk és belesütjük
2) Extrahálás: több órás keverés és ecetsav-nátrium-acetátos vegyes észter oldattal végzett extrahálás után szívással távolítsuk el a vizet, mossuk, majd keverjük és több órán át nátrium-karbonátos nátrium-hidrogén-karbonát pufferoldattal extraháljuk, majd szivattyúzzuk, szűrjük és vízzel mossuk.
3) A pufferoldattal kivont agargélt vízzel melegítve 4%-os oldatba oldjuk, majd hőtartósítás mellett 3-4 órán át keverés céljából DEAE cellulózt adunk hozzá, majd centrifugáljuk. A szűrletet összegyűjtjük és szűrjük, így fehér oldatot kapunk kolloid állapotban
4) Dehidratálás: a fehér szűrlet felmelegítése után gyorsan adjunk hozzá 95%-os etanolt keverés közben, amíg nyilvánvaló csapadék nem keletkezik, hűtsük le szobahőmérsékletre, öntsük ki a felső réteg oldatát, mossuk és szárítjuk a csapadékot, hogy megkapjuk a terméket, 71%-os hozammal.
Reagens kinyerés DEAE cellulóz kinyerése: centrifugálás után a csapadékot vízzel felforraljuk, 100 mesh selyemszöveten szűrjük, többször ismételjük, amíg a szűrlet tiszta nem lesz, majd 0,5 mol/1 sósavval, 0,5 mol/1 NaOH-val és vízzel mossuk és szárítjuk. A visszanyerési arány 95% A 80 C-os frakciót a Yichun vizes oldatból kinyert etanolos vizes oldat közvetlen desztillációjával gyűjtöttük össze. Ezután adjunk hozzá szilárd nátrium-kloridot telítésig, és folytassuk a desztillációt. . 70% tölthető fel. Miután a palackban lévő nátrium-klorid elpárolog, szeleppel is feltölthető.
Agaróz poregy tengeri moszatból kivont poliszacharid, és az agar fő összetevője. Felfedezése óta számos területen széles körben alkalmazzák egyedülálló fizikai és kémiai tulajdonságainak köszönhetően, mint például gélképző képesség, hőstabilitás, kémiai stabilitás és biokompatibilitás. Az alábbiakban részletesen ismertetjük a célját:
Az agaróz gél elektroforézis a molekuláris biológia egyik leggyakrabban használt elválasztási és elemzési technikája. A gélelektroforézis közegeként az agaróz előnye a nagy pórusméret, a széles elválasztási tartomány és az egyszerű működés. Az elektroforézis során biológiai makromolekulák, például DNS, RNS vagy fehérje vándorolnak át az agarózgél pórusain elektromos tér hatására. A különböző molekulák töltésének, méretének és alakjának különbségei miatt eltérő a vándorlási sebességük a gélben, így valósul meg az elválasztás. Az agaróz gélelektroforézist széles körben használják génklónozásban, génexpressziós elemzésben és génmutáció kimutatásban. Általában hordozóként vagy mátrixként használják sejttenyészetekben. Kiváló biokompatibilitása és kémiai stabilitása miatt az agaróz stabil növekedési környezetet biztosít a sejtek számára. Például a lágy agar telepképzési kísérletben agarózt használnak félszilárd táptalaj előállítására a sejtek telepképző képességének kimutatására, ami nagy jelentőséggel bír a sejtek rosszindulatú átalakulásának mértékének értékelésében.
Ezenkívül az agaróz más bioanyagokkal is kombinálható, hogy kompozit állványanyagokat készítsenek szövetmérnöki és regeneratív gyógyászatban való felhasználásra. Az agaróz gél az immundiffúzióban és az immunelektroforézisben is fontos szerepet játszik. Ezekben a technológiákban az agaróz gél, mint az antigén és antitest reakció közege, tiszta kicsapódási vonalakat vagy gyűrűket képezhet, amelyek segítségével kimutatható és analizálható az antigén vagy antitest jelenléte és koncentrációja. Az agaróz gél pórusmérete és töltéstulajdonsága befolyásolhatja az antigén és antitest diffúziós sebességét és kötési hatékonyságát, így a kísérleti körülmények az agaróz koncentrációjának és típusának beállításával optimalizálhatók.
Alkalmazás a molekuláris biológiai kísérletekben
Az agaróz gélelektroforézis nemcsak a DNS és az RNS szétválasztására használható, hanem más technológiákkal is kombinálható a tisztításuk érdekében. Például a DNS-kivonás folyamatában agaróz gélelektroforézissel kimutatható a DNS integritása és tisztasága, majd gélvágással és kinyeréssel a cél DNS-szakaszt elválasztható a géltől. Ennek a módszernek az előnye a könnyű kezelhetőség és a magas visszanyerési sebesség. A nukleinsav-hibridizációs kísérletekben az agarózgél szilárd fázisú hordozóként használható a DNS- vagy RNS-próbák gélen történő rögzítésére, majd hibridizálható a jelölt célnukleinsavval. A hibridizációs jelek jelenlétének és intenzitásának kimutatásával meghatározható a célnukleinsavak jelenléte és koncentrációja.
Az agaróz gél pórusmérete és töltéstulajdonsága befolyásolhatja a próba és a célnukleinsav kötési hatékonyságát, így a hibridizációs körülmények az agaróz koncentrációjának és típusának beállításával optimalizálhatók. A polimeráz láncreakció (PCR) az egyik leggyakrabban használt technika a molekuláris biológiában a DNS amplifikálására. A PCR termékek elemzésében az agaróz gél elektroforézis az egyik leggyakrabban alkalmazott módszer. A PCR-termékek elektroforézissel történő elválasztásával kimutatható az amplifikált fragmensek mérete és tisztasága, így megállapítható, hogy a PCR-reakció sikeres-e, és hogy vannak-e nem specifikus amplifikációs problémák.
Az agaróz gél pórusmérete ugyan viszonylag nagy, de kis molekulájú fehérjék szétválasztására nem alkalmas, de bizonyos esetekben fehérjeszétválasztásra, tisztításra így is használható. Például a preparatív gélelektroforézisben az agarózgél használható nagyobb molekulatömegű fehérjék elkülönítésére és tisztítására. Ezenkívül az agaróz más anyagokkal is kombinálható kompozit gél előállítására, amely kiterjeszti az elválasztási tartományt és javítja az elválasztás hatékonyságát. Egyes enzimaktivitás-meghatározási kísérletekben az agarózgél hordozóként használható az enzimimmobilizáláshoz. Az enzim agarózgélen történő rögzítése megőrizheti az enzim aktivitását és stabilitását, és megkönnyítheti az enzim elválasztását és kinyerését a reaktánsoktól. Ezt a módszert széles körben alkalmazzák az enzimtechnológia területén.
Alkalmazás a mikrobiológiában
Az agarózt általában koagulánsként használják mikrobiális táptalajokban. Az agarhoz képest az agaróz nagyobb tisztaságú és alacsonyabb szennyezőanyag-tartalommal rendelkezik, így alkalmasabb mikrobiális tenyésztésre. Szilárd táptalaj készítésekor oldjuk fel az agarózt forró vízben, majd adjunk hozzá más tápanyagokat és antibiotikumokat, és hűtsük le, hogy szilárd táptalajt kapjunk. Az ilyen típusú táptalaj stabil növekedési környezetet biztosít a mikroorganizmusok számára, megkönnyítve izolálásukat, tisztításukat és azonosításukat. Mikrobiológiai azonosítási kísérletekben az agaróz gélt specifikus azonosító közegek készítésére lehet használni. Például a bélbaktériumok azonosításakor a specifikus cukrokat tartalmazó agaróz táptalaj felhasználható a különböző típusú baktériumok megkülönböztetésére a cukrok fermentációjának megfigyelésével. Ezenkívül az agarózgél felhasználható biokémiai reakcióközegek előállítására is mikroorganizmusok számára metabolikus jellemzőik és enzimaktivitásuk kimutatására.
Agaróz poráltalában 90 fok fölé melegítik, hogy vízben oldódjon, és amikor a hőmérséklet 35-40 fokra csökken, jó félszilárd gélt képez, ami a fő jellemzője és alapja a különféle felhasználási módoknak. Az agaróz gél teljesítményét általában a gél erőssége fejezi ki. Minél nagyobb a gél szilárdsága, annál jobb a teljesítménye. Az agaróz géljét hidrogénkötések okozzák. Minden olyan tényező, amely elpusztíthatja a hidrogénkötéseket, a gél tönkremeneteléhez vezethet. Az agaróz hidrofil és szinte teljesen mentes a töltött csoportoktól. Ritkán okoz denaturációt és adszorpciót érzékeny biológiai makromolekulákhoz. Ideális inert hordozó. Az agaróz előállítása során az agar pektint a lehető legnagyobb mértékben el kell távolítani, különben nagyon kis mennyiségű szulfát és piroszőlősav lehet az agaróz ionizáló csoportjának pótlására, ami elektroozmózist (EEO) okoz és befolyásolja a részecskék mozgását. A jó minőségű agaróz szulfáttartalma viszonylag alacsony, általában 0,2% alatti, az elektroozmózis pedig viszonylag kicsi, általában 0,13 alatti. Ez az oka annak, hogy az agaróz olyan drága, mint az agar.
1937-ben Araki először különítette el az agarózt az agartól, de hjertin csak 1961-ben fedezte fel először az agaróz kiváló teljesítményét, amely egyre több figyelmet vonzott és megkezdte az ipari termelést. Az agarózt széles körben használják klinikai vizsgálatokban, biokémiai elemzésekben és biomakromolekulák elválasztásában.
Az agarózpor alapvető eszköz a molekuláris biológiában és a biotechnológiában, széles körben alkalmazható gélelektroforézisben, affinitáskromatográfiában, immundiffúzióban és immunelektroforézisben. Egyedülálló tulajdonságai, mint például a könnyű használhatóság, sokoldalúság, alacsony toxicitás és költséghatékonyság,{1}}a laboratóriumi kutatások nélkülözhetetlen elemévé teszik. Korlátai, például a korlátozott felbontás és a ridegség ellenére az agarózgél-technológia legújabb fejlesztései, beleértve a nagy-felbontású zseléket, az előreöntött géleket és az agaróz-alapú mikrofluidikus eszközöket, kibővítették a használhatóságát és javították a teljesítményét. A tudományos kutatás előrehaladtával az agarózpor kétségtelenül értékes és nélkülözhetetlen reagens marad a molekuláris biológiai és biotechnológiai eszköztárban.
Népszerű tags: agaróz por cas 9012-36-6, beszállítók, gyártók, gyár, nagykereskedelem, vétel, ár, ömlesztve, eladó