Ninhidrin-hidrát CAS 485-47-2

Ninhidrin -hidrátegy szerves vegyület a C9H6O4 molekuláris képlettel, CAS 485-47-2 és a molekulatömeg 178.141. Ez egy majdnem fehér kristályos vagy világos sárga kristályos por, éterben és kloroformban kissé oldódik, és 100 fok fölé pirossá válik. Könnyen feloldható vízben, etanolban oldható, kissé oldódik éterben és kloroformban. Felhasználható kolorimetrikus szondaként az aminosavak és fehérjék kvantitatív elemzésére. Használható a roteció monitorozására szilárd fázisú peptid szintézisben (Kaiser teszt). A peptidlánc a szilárd mátrixhoz van csatlakoztatva a C-terminálison keresztül, és az N-terminust a peptidlánc kibővítésére használják. Amikor az N-terminális visszaszorításra kerül, a ninhidrin teszt kék színű. Az aminosavmaradékok a peptidlánchoz kapcsolódnak, miközben az N-terminálison védik. Ezért, ha a következő aminosavmaradék sikeresen kapcsolódik a peptidlánchoz, akkor a ninhidrin teszt színtelen vagy sárga eredményt eredményez.

Ninhidrin -hidrát, más néven dihidroindén-1,2,3-trione-hidrát, a C9H6O4 molekuláris képletű, fehér vagy halványsárga kristályos por, egyedi trikarbonilszerkezetű. A molekulájában lévő erősen elektrofil központi szénatom magi reagenssé teszi a vegyületeket tartalmazó aminosavak kimutatására, amelyeket széles körben használnak olyan területeken, mint a biokémia, a kriminalisztika, a klinikai diagnózis, a mezőgazdasági tudomány és az anyagok elemzése.

Kémiai reakció mechanizmus és az indenon színfejlesztési jellemzői

 

Az indenon színreakciója az alfa -amino -csoportokat tartalmazó vegyületekkel való specifikus reakción alapul. Gyengén savas körülmények között (pH 4-6) az indánon háromlépéses reakción megy keresztül alfa-aminosavakkal:

Kondenzációs reakció: A - amino -csoport dehidrációs kondenzációja indánonnal, hogy Schiff alapot képezzen;
Dekarboxilezés izomerizáció: A Schiff bázis dekarboxiláción megy keresztül, és izomerizációja az iminré, felszabadítva egy molekulát;
Az oxidáció csökkentése és a szín fejlődése: Az imin tovább reagál az indiai -ketonnal, hogy mélykék - lila Ruhemann lila komplexet képezzen, maximális abszorpciós hullámhossza 570 nm.
Különleges eset: A prolin és a hidroxi -prolin eltérő reakcióútvonalakkal rendelkezik a pirrolidin gyűrűk jelenléte miatt, ami sárga termékek képződését eredményezi; Az aszparaginsav reagál barna anyag előállításához. Ez a szelektivitás az indeén -ketont fontos eszközévé teszi az aminosavszerkezet elemzéséhez.

Alkalmazások a biokémiában és a klinikai diagnózisban

 

1. Az aminosavak és fehérjék kvantitatív elemzése
Az indeén -keton az aminosav -analizerek magszín színű reagense. A kromatográfiás elválasztás után az indenon aminosavakkal reagál, és színes komplexet képez, amelyet kolorimetriával számszerűsítünk 570 nm hullámhosszon spektrofotometriával. Például:

Élelmiszer -tesztelés: Határozza meg a tejben lévő lizintartalmat és értékelje a fehérje táplálkozási értékét;
Klinikai diagnózis: A rendellenes aminosav -metabolizmus kimutatása a vizeletben (például feniletonuria);
Kábítószerfejlesztés: Elemezze a peptid gyógyszerek tisztaságát a kötegelt következetesség biztosítása érdekében.
Műszaki előnyök: Nagy érzékenység (detektálási határ a Dana molar tartományban), széles lineáris tartomány (0,1-100 μ mol/L), komplex mátrix-elemzéshez.

 

2.
A szilárd fázisú peptid-szintézis során az indenont valós időben ellenőrzik a dotrolekciós lépésekhez a Kaiser tesztelésiDeprotection detektálásán keresztül: Amikor a peptidlánc N-terminális védőcsoportja (például FMOC) eltávolítja a peptidláncot, a szabad amino-csoport és az Indenone közötti reakció kéknek tűnik, jelezve a reakció befejezését;
A kapcsolási hatékonyság értékelése: Ha a következő aminosav sikeresen kapcsolódik, akkor az N-terminális aminocsoport védett, és az indánon teszt színtelen vagy sárga színű, a szintézis körülményei ennek megfelelően optimalizálhatók.

 

ESET: Az angiotenzin II szintézise során (ASP Arg Val Tyr Ile Pro Phe) a Kaiser tesztelése megerősítette, hogy az egyes lépések kapcsolási hatékonysága meghaladja a 99%-ot, és a végtermék tisztasága elérte a 98,5%-ot.

3. A fehérje hidrolízis termékeinek elemzése
Az indein -keton kimutathatja a szabad aminosavakat a protein -hidrolizátban, és segíthet az enzimatikus hidrolízis mechanizmusok vizsgálatában. Például:

A kazein enzimatikus hidrolízise gyomor proteáz által: a fenilalanin és a leucin felszabadulásának számszerűsítése ninhidrin kolorimetrikus módszerrel az enzimaktivitás értékelésére;
Mikrobiális fermentáció monitorozása: Elemezze az aminosavprofilt az élesztő fermentációs levesben, és optimalizálja a fermentációs folyamatot.

Kriminalisztikai és bűnügyi nyomozás alkalmazása

 

1. A látens ujjlenyomatok fejlesztése
Az Indene -keton az "arany standard" reagens a kriminalisztikai ujjlenyomat -kimutatáshoz. Az ujjlenyomatok izzadása aminosavakat (például lizint és szerinnel) tartalmaz, amelyek ninhidrinnel reagálnak, hogy lila komplexet képezzenek. A képalkotó hatás jobb, mint a hagyományos jódfűtés.

Működési folyamat:

Permetezzen 0,2% ninhidrin -etanol oldatot a minta felületére;
A 10 percig 60 fokos fűtés elősegíti a reakciót;
A lila ujjlenyomatvonalak jól láthatók és több hónapig tárolhatók.
ESET: A 2023 -as betörési ügyben a rendõrség sikeresen megoldotta az ügyet úgy, hogy a gyanúsított ujjlenyomatait az ajtófogantyúból kinyerte ninhidrin képalkotó technológiával.

 

2. A schistosoma tojás aktivitásának azonosítása
A schistosoma tojások szukcinát dehidrogenázt tartalmaznak, amelynek nagy aktivitása van, és katalizálhatja az indenon redukcióját lila termékek előállításához; A halott tojásoknak nincs enzimatikus aktivitása, és sárga színűnek tűnnek. Ezt a módszert használják a schistosomiasis terápiás hatásának értékelésére:

Kezelés előtt: Az élő tojások színmegjelenítési aránya meghaladja a 80%-ot;
A kezelés után, ha az élő tojások színes megjelenítési aránya kevesebb, mint 10%, ez azt jelzi, hogy a gyógyszer hatékony.

Alkalmazások a mezőgazdasági tudomány területén

 

1. A talaj mikrobiális szénforrásainak felhasználásának kutatása
Az indeon -keton nyomon tudja követni a jelölt szubsztrátok abszorpcióját a mikroorganizmusok által. Például:

Adjon hozzá ¹ ³ C jelölt karbamidot a talajhoz;
Kivonja a mikrobiális fehérjéket és engedje fel a karboxil -szén ninhidrinnel;
A karbamid -szén arányát a mikrobiális biomasszába jutó karbamid -szén arányának számszerűsítésével az ¹ ³ C/¹ ² C arány mérésével egy izotóp -tömegspektrométerrel.
Kutatási szignifikancia: Az ammónia oxidáló baktériumok (például nitrosomonas) szén -dioxid -rögzítési mechanizmusának feltárása és a nitrogén műtrágya alkalmazási stratégiáinak optimalizálása.

 

2. A növényi aminosav -metabolizmus elemzése
Az Indene -keton a papírkromatográfiával (PC) kombinálva gyorsan elemezheti az aminosav -összetételt a növényi szövetekben. Például:

Szabad aminosavak extrahálása a rizslevelektől;
Folt a szűrőpapíron, N-butanol ecetsav víz (4: 1: 1) felhasználásával fejlődő szerként;
Permetezze be a ninhidrin oldatot, melegítse a színfejlesztést, kiszámolja az RF értéket, és azonosítsa az aminosav típusát.
Alkalmazási forgatókönyv: A stresszálló fajták (például sótoleráns rizs) szűrése és az aminosavak szerepének tanulmányozása a stresszválaszban.

Alkalmazások az anyagtudományban és az ipari tesztelésben

 

1. vékonyréteg -kromatográfia (TLC) Színreagensek
Az Indene Ketone egy univerzális színű reagens az aminvegyületek TLC kimutatására

Kimutatási tartomány: primer aminok, szekunder aminok, aminosavak, aminosav -észterek;
Működési pontok: A színfejlesztő permetezése után melegítse fel 105 fokos 5 percig, és a lila foltok jól láthatók;
Érzékenység: képes kimutatni a nanogramszintű amin anyagokat.
Eset: A gyógyszer -szintézis során a közbenső termékek tisztaságát a ninhidrin TLC módszerrel figyeljük a reakció szelektivitásának biztosítása érdekében.

2. Az aminosavatartalom meghatározása a polimer anyagok felületén
Az indeon -keton kvantitatív módon elemezheti a polimerek, például a kitozán és a polilizin felületén lévő szabad amino -csoportokat
Merítse el az anyagot az indein -keton oldatába, a hő és a reagálás, és mérje meg az abszorbanciát;
Számítsa ki az amino -tartalmat a standard görbén keresztül, és értékelje az anyag módosítási hatását.
Kutatási szignifikancia: Az orvosbiológiai anyagok, például a szöveti műszaki állványok funkcionális tervezésének irányításához.

Egy szintézis módszerninhidrin -hidrát, a reakció útvonala a következő:

Az S1 lépés kifejezetten a következő műveleteket tartalmazza: Oldja fel a dihidroinden-1,3-diketont etanolban, adjon hozzá kénsav-oldatot, dobja el a nátrium-nitrit oldatot, ellenőrizze a reakcióhőmérsékletet 15-20 fokon, tesztelje a reakció végpontját kálium-jodid-keményítő-tesztpapírral, és kapjon finom por 2-nitrozo-1H-indene-1,3 (2H)-DnieE-t. A kénsav-oldat tömegfrakciója 50-60%, a nátrium-nitrit oldat tömegfrakciója pedig 25-30%. A kálium -jodid -keményítő tesztpapírral tesztelt reakció végpontja az, hogy a kálium -jodid -keményítő tesztpapír nem alakul ki színben.

Az S2 lépés kifejezetten a következő műveleteket tartalmazza: 2-nitrozo-1H-indén-1,3 (2H)-A Dione-t a formaldehiddel helyettesítik sósav jelenlétében, hogy az indiai-1,2,3 trionát 15-20 fokon kapjuk. A sósav tömegfrakciója 25-30%, a formaldehid tömegfrakciója pedig 35-37%.

Az S3 lépés kifejezetten a következő műveleteket tartalmazza: kilenc-1,2,3 trione hozzáadása az extrakciós oldatba, a csapadék kicsapását és a csapadék csökkentését csökkentett nyomáson 50-60 fokos szárítás mellett, hogy csökkentett kilenc-1 trionát kapjunk; Az extrakciós oldat egy alacsony nátrium -szulfitból és 35 ~ 37WT% ipari formaldehidből álló oldat, 1: 1 tömeg arányban.

Az S4 lépés kifejezetten magában foglalja a következő műveleteket: oxidálja a redukált ninhidrint salétromsav -oldatban 60 ~ 80 fokos hőmérsékleten, hogy nyers ninhidrint kapjon, átkristályosítsa a nyers ninhidrint és a vizet 1: 5 tömeg arányban, szárítsa meg a kapott szilárd anyagot kalcium -kloriddal, vákuum szárítsa meg 45 ~ 50 fokon, hogy hidratált ninhidrint kapjon.

Jellemző reakció:

A ninhidrin egy reagens, amelyet ammónia vagy primer és szekunder aminok kimutatására használnak. Ha ezekkel a szabad aminokkal reagál, sötétkék vagy lila anyag állítható elő, amelyet Ruhemann lila -nak hívnak. Gyakran használják az ujjlenyomatok észlelésére. Ennek oka a fehérjékben és peptidekben található lizinmaradékok az ujjlenyomat felületéről, és az elsődleges amint ninhidrin detektálja. Szobahőmérsékleten egy fehér szilárd anyag, etanolban és acetonban oldódik. A ninhidrin a dihidroinden-1,2,3-trinon hidrátjának tekinthető.

Reakcióképesség:

A karbonilcsoport szénatomja részben pozitív töltésű. Ha a hozzá csatlakoztatott szomszédos csoport képes elektronok vonzására (például a karbonilgyökökre), akkor a karbonil -szén pozitív töltése tovább erősödik. Ezért az 1,2,3-trikonilvegyületek központi szénatomja inkább elektrofil, mint az egyszerű ketonok. Ezért az indán-1,2,3-trione könnyen reagálható nukleofilekkel, például vízzel. A legtöbb karbonilvegyületnél azonban a karbonil formája stabilabb, mint a vízkötő termékeké. Ennek az oka, hogy a ninhidrin a központi szénatom stabil hidrátját képezheti a szomszédos karbonilcsoport destabilizációjának. Meg kell jegyezni, hogy a ninhidrin -kromofor előállításához az amint egy molekulával kell kondenzálnininhidrin -hidrátSchiff bázis előállításához. Csak az ammónia és az elsődleges amin lehet átmenni ezen a lépésén. A SCHIFF bázisátvitelhez protonokat kell használni, tehát ha az aminnal szomszédos szén tercier szénatom, akkor azt termékkel nem lehet kimutatni. A ninhidrin és a szekunder amin reakciója imin sót eredményez ([R1R2C=NR3R4]+), és az imin só szintén színű, általában narancssárga.

Népszerű tags: Ninhidrin-hidrát CAS 485-47-2, Szállítók, gyártók, gyár, nagykereskedelem, vétel, ár, ömlesztett, eladó