5-Jodocitidinegy jódot tartalmazó nukleotid molekula, amelyet széles körben használnak a biomedicina területén. Az alábbiakban a 5-jodocitidin számos szintetikus módszerét mutatjuk be.
(1) Pirimidin módszer
Ezzel a szintézismódszerrel először a pirimidint ózonnal reagáltatva 5-oxopirimidint kapnak, majd metil-jodiddal reagáltatva 5-jód-2'-dezoxiuridint kapnak, végül 1,{{5}-dal redukálják. }}diklór-2-propanol A reakció során 5-jodocitidin képződik. Az ezzel a módszerrel szintetizált termék nagy tisztaságú, de sok lépésből áll, és a reakciókörülményekre vonatkozó követelmények viszonylag magasak. A konkrét lépések a következők:
1. lépés: Készítse elő a szükséges alapanyagokat
Először a következő nyersanyagokat kell elkészíteni:
- 5-aminoketóz (5-amino-2,3,5-tri-O-acetil- -D-ribofuranóz)
- 5-jodouracil (5-jodouracil)
- Triklór-ecetsav
- nátrium-hidroxid oldat (NaOH)
- Hidrogén vagy hidrogéngáz (H2)
- difoszfor-pentoxid
- Etanol (etanol)
- Dimetil-acetamid (DMA)
2. lépés: A 5-jodocitidin előállítása:
- 2.1. lépés
Az 5-aminoketózt és a 5-jóduracilt triklór-ecetsav oldatban reagáltattuk szobahőmérsékleten több órán át. Ez a lépés a 5-jodocitidin legfontosabb lépése.
- 2.2. lépés
A reaktánsokat feldolgozzuk, hogy megszabadítsuk a triklór-ecetsavtól. A reakcióelegyet cseppenként pirofoszforsav-anhidriddel bevont szűrőpapírra adjuk. A szilárd anyagot nátrium-hidroxid, víz, etanol és diacetamid egymást követő oldataival mostuk. Mosás után a szilárd anyagot megszárítottuk, így 5-jodocitidint kaptunk.
3. lépés: Következtetés:
A pirimidin módszer hatékony módszer a 5-jodocitidin előállítására. Az 5-aminoketóz és a 5-jód-uracil triklór-ecetsavban való reakciója több lépés után a 5-jodocitidin végső előállításához vezet.
(2) Aldonsav-származékképzési módszer:
A módszerrel először a 5-klór-2'-dezoxiuridint állítják elő a 5-klóruridin 3,4,6-tri-O-acetil-glükonsavval történő észterezésével, majd jódozási reakciót hajtanak végre. 5-jód- 2'-dezoxiuridin. Végül a 5-jodocitidint redukciós reakcióval nyerik. A módszer előnye az egyszerű működés és a nagy terméktisztaság. A részletes lépések a következők:
1. A 5-hidroxi-metil-2'-dezoxicitidin (5-HmdC) szintézise: szuszpendálja a 2'-dezoxicitidint 1,4-dioxánban, adjon hozzá acetil-kloridot és alumínium-trikloridot, reagáljon 5-Acetoximetil-2'-dezoxicitidin keletkezik. Ezután az 5-acetoximetil-2'-dezoxicitidint feloldottuk metanolban, és hozzáadtunk THF-et, vizet és NaBH4-et, hogy 5-HmdC-t hozzunk létre.
2. 5-Jodocitidin szintézise: Oldja fel a 5-HmdC-t hidrogén-bromidban és ecetsavban, melegítse 6 órán át, hogy 5-jodocitidin keletkezzen.
3. 5-Jodocitidin-aldonsav-származékok szintézise: Oldja fel a 5-jodocitidint foszfátpufferben. Adjunk hozzá aldonsavat és reagáltatjuk 2 órán át. A reakciót ezután metil-formiáttal és trietil-szilil-kloriddal leállítjuk. A reakcióelegyet leszűrjük, és kicsapással a 5-jodocitidin-aldonsav-származékot kapjuk.
4. Tisztítás: A kapott terméket meg kell tisztítani, és nagy teljesítményű folyadékkromatográfiát (HPLC) lehet használni az elválasztáshoz és tisztításhoz.
A fentiek a 5-jodocitidin-aldonsav származékképzési módszer részletes lépései. A módszerrel nagy tisztaságú 5-jodocitidin-aldonsav-származékok állíthatók elő, és számos biomedicina és gyógyszerkutatási igény kielégíthető.
(3) Savas cukor-anhidrid módszer:
Ezzel a módszerrel először a 2',3'-di-O-metil-glükozidot fumársavval reagáltatva 2',3'-di-O-metiluridinsót kapnak, majd 5'-jóddá-2' alakítják át, 3'-di-O-metiluridin sót, végül a 5-jodocitidint a metilcsoport eltávolításával kapják. Az eljárás enyhe reakciókörülményeket és nagy tisztaságú szintetikus termékeket tartalmaz, de viszonylag nagy tisztaságú nyersanyagokat igényel. Előnye az egyszerű működés és a nagy hozam. Az alábbiakban a szintetikus lépések részletes ismertetése olvasható.
1. A 5-jód-2'-dezoxicitidilát (CIDC-észter) szintézise
(1) Oldjunk fel 5-jodocitidint (1.0g, 3,73 mmol) 4 ml vízmentes trietil-aminban, és hűtsük le 0 fokra jeges vízfürdőben;
(2) Az oldathoz dietil-karbonátot (0,70 ml, 4{5}} mmol), majd lassan dimetil-formamidot (DMF) (0,50 ml, 6,9 mmol) adunk. cseppenként, és 30 percig reagáltatjuk;
(3) Adjunk hozzá nátrium-hidroxidot (0,50 g, 12,5 mmol), és keverjük 30 percig;
(4) Adjunk hozzá acetonitrilt (10 ml), és szellőztessünk nitrogénatmoszférával 10 percig;
(5) Adjunk hozzá tetrabutil-réz(II)-hidroxidot (0,61 g, 2,50 mmol), keverjük tovább, és reagáltatjuk 1 órán át;
(6) Adjon hozzá ecetsavanhidridet (0,53 ml, 50 mmol), keverje tovább, és reagáljon 2 órán át.
2. A 5-jodocitidin szintézise
(1) Adjunk dibutil-foszfátot (2 ml, 1 0,0 mmol) a lehűtött reakcióoldathoz, és keverjük 1 órán át;
(2) Adjunk hozzá kloroformot (20 ml), keverjük jól össze, és mossuk vízzel;
(3) A nátrium-perszulfátot és a szilikagél oszlopot, amelyből a szerves fázist szárítjuk, az oszlopra töltött oszlopban mossuk:
(4) Centrifugálással koncentrálja a szerves fázist, hogy 5-jodocitidint kapjon.
A fentiek a 5-jodocitidin savas vízmentes módszerét és annak részletes lépéseit mutatják be. A szintézis folyamata során ügyelni kell a vegyi anyagok biztonságára és a laboratórium biztonsági előírásaira. Az üzemeltetés során be kell tartanunk a helyes laboratóriumi működési eljárásokat, erősítenünk kell a biztonságtudatosságot, jó munkát kell végeznünk a laboratóriumi biztonsági védelemben, gondoskodnunk kell a laboratóriumi személyzet biztonságáról.
(4) Brómozási módszer:
Ezzel a módszerrel a 5-brómouracilt uracil foszfor-tribromiddal való reagáltatásával nyerik, majd metilezési reakción megy keresztül, hogy 5-bróm-2'-dezoxiuridint kapjanak. Katalitikusan redukálják nátrium-hidroxiddal és ammónium-perszulfáttal, így 5-jodocitidint kapnak. A módszer kevesebb reakciólépést tartalmaz, de a termék alacsonyabb tisztaságú. A részletes lépések a következők:
1. Terc-butil-izocianát előállítása: Vegyünk izocianátot, adjunk hozzá acetont és trietil-amint, fújjuk át nitrogént, és forraljuk visszafolyató hűtő alatt 2 órán át. A reakcióoldatot szobahőmérsékleten hagyjuk. Szűrjük le a csapadékot a szervetlen sók eltávolítására, majd ismét pároljuk be, hogy végül terc-butil-izocianátot kapjunk.
2. A 5-klórcitidint 5-jódocitidinné alakítsa át: reagáltassa a 5-klór-citidint, a jódhidrogénsavat és az ecetsavat metanolban, hogy azt 5-jódocitidinné alakítsa. Ugyanakkor a jodid és a feleslegben lévő kálium-jodid is felhasználható a vízben való reakcióhoz, míg a kolloid ezüst hozzáadásával a 5-klór-citidint 5-jódocitidinné alakítják.
3. Adjunk terc-butil-izocianátot a 5-jodocitidinhez a reakcióhoz: Miután megkaptuk a 5-jodocitidint, oldjuk fel nátrium-hidroxid-oldatban, és adjunk hozzá terc-butil-izocianátot. A reakcióidő szobahőmérsékleten 2 óra volt. A reakció befejeződése után ecetsavval megsavanyítjuk, és a kapott terméket hidrogén-karbonát-diészterhez adjuk extrakció céljából.
4. A 5-jodocitidin tisztítása: Tisztítsa meg a 5-jodocitidint, hogy megkapja a 5-jodocitidin végterméket.
Röviden, a 5-jodocitidin brómozási módszerének lépései viszonylag bonyolultak, és gondosan kell elsajátítani és gyakorolni őket.
Röviden, a 5-jodocitidin szintetizálásának számos módja van, és a tényleges igényeknek megfelelően különböző módszerek választhatók ki a nagy tisztaságú 5-jodocitidin előállításához.