Dihidroetidium, CAS száma 104821-25-2, A C21H21N3 molekuláris képlet, pontos molekulatömege 315,41, fontos vegyület, kiterjedt biológiai alkalmazásokkal. Általában finom kristályos porként jelenik meg, a rózsaszíntől a lilaig. Ez az egyedi szín megkönnyíti a laboratóriumban való felismerést, és természetes fluoreszcens hátteret biztosít a fluoreszcens szondaként való felhasználásához. A kémiai és biológiai kutatások során gyakran szondaként használják a reaktív oxigénfajok kimutatására, különösen az intracelluláris szuperoxid anionok kimutatására, rendkívül nagy hatékonysággal. Ez a festék szabadon beléphet a sejtekbe és dehidrogenizálhatja az etidium -bromid képződését. Ezt a szondát széles körben használják az NK sejtekben, és fontos festékként a sejtek proliferációjának és a hypoxia azonosításához a daganatokban.
|
|
|
|
Vegyi képlet |
C56H92O29 |
|
Pontos tömeg |
1229 |
|
Molekulatömeg |
1229 |
|
m/z |
1229 (100.0%), 1230 (60.6%), 1231 (18.0%), 1231 (6.0%), 1232 (3.6%), 1232 (3.5%), 1230 (1.1%), 1233 (1.1%), 1230 (1.1%) |
|
Elemi elemzés |
C, 54.71; H, 7.54; O, 37.74 |
Dihidroetidium, mint egy kék fluoreszcens szondaként, amely behatolhat a sejtekbe, fontos szerepet játszik a biológia és az orvostudomány területén. Egyedülálló fluoreszcencia tulajdonságai lehetővé teszik a szuperoxid-anionok (O2-) szintjének kimutatását a sejtekben, ezáltal feltárva a reaktív oxigénfajok mechanizmusait a sejtek fiziológiájában és patológiájában.
1. Sejt képalkotás
A dihidroetilén, mint fluoreszcens szonda, beléphet a sejtekbe és kötődik a DNS -hez, és vörös fluoreszcenciát bocsát ki. Ezért széles körben használják a sejtképzési technológiában a redox státus megfigyelésére a cellákon belüli - idő alatt. Az olyan berendezések révén, mint a fluoreszcencia mikroszkópia vagy az áramlási citometria, a kutatók megfigyelhetik a dihidroetilén -diamin eloszlását és változásait a sejtekben, megértve a sejtek redox állapotát fiziológiai vagy kóros állapotokban.
2. Redox állapotérzékelés
Az etilén -dihidrogén -ingtu fluoreszcencia tulajdonságai ideális eszközt jelentenek a redox állapot kimutatására. A sejteken belül a dihidroetilén -diamin szuperoxid anionokkal oxidálható, hogy etilén -diamint képezzen, amely ezután kötődik a DNS -hez és vörös fluoreszcenciát bocsát ki. Ezért a dihidroetilén -diamin fluoreszcencia intenzitásának kimutatásával az intracelluláris szuperoxid -anionok szintje közvetett módon tükröződik, ezáltal kiértékelve a sejtek redox státusát. Ennek a kimutatási módszernek a nagy érzékenység, a specifitás és a nagy- teljesítmény előnyei vannak, amelyek hatékony eszközt biztosítanak a celluláris redox állapot dinamikus változásainak tanulmányozásához.
3. Daganatkutatás
A dihidroetilén széles körű alkalmazást mutat a tumorkutatásban. A tumorsejtek magas redox szintje miatt a dihidroetilén -diamin hatékony tumor markerként szolgálhat a daganatok korai diagnosztizálásához és terápiás értékeléséhez. Ezenkívül a dihidroetilén -diamin felhasználható a tumorsejt proliferáció, az apoptózis és az invázió biológiai folyamatainak tanulmányozására is, amelyek fontos nyomokat adnak a tumor előfordulásának és fejlődésének mechanizmusainak feltárására.
4. Kábítószer -szűrés
A dihidroetilén -diamin szintén fontos szerepet játszik a gyógyszerszűrésben. Számos gyógyszer, miközben terápiás hatást gyakorol, szintén hatással van a sejtek redox állapotára. Ezért a dihidroetilén -diamin fluoreszcencia intenzitásának kimutatásával kiértékelhetők a gyógyszerek a sejtek redox státusára gyakorolt hatása, és a potenciális terápiás gyógyszerek kiszűrhetők. Ezenkívül a dihidroetilén -diamin felhasználható a gyógyszerek és a tumorsejtek közötti interakciós mechanizmus tanulmányozására, erősen támogatva a gyógyszerfejlesztést és a klinikai alkalmazást.
5.
A dihidroetilént a biológiai biztonsági értékelés területén is felhasználhatók. A környezeti szennyező anyagok és a toxinok hatására a sejtek redox állapota megváltozhat. A dihidroetilén -diamin fluoreszcencia intenzitásának kimutatásával kiértékelhető ezeknek az anyagoknak a sejtek redox státusára gyakorolt hatása, ezáltal felmérve biológiai biztonságukat. Ez a módszer nagy jelentőséggel bír a környezeti szennyező anyagok lehetséges kockázatainak felmérésében és az emberi egészség biztosításában.
A részletes lépések és a megfelelő kémiai egyenletek adihidroetidiumA laboratóriumban olyan folyamat, amely magában foglalja a szerves kémiai szintézist.
1. A nyersanyagok előkészítése
Kezdő anyagok: Válasszon egy megfelelő kiindulási anyagot, amely lehet egy benzolgyűrűt és egy amino -csoportot tartalmazó vegyület.
Oldószerek és katalizátorok: Válasszon megfelelő oldószereket (például etanol, metanol stb.) És katalizátorokat (például átmeneti fémkatalizátorokat) a reakció típusa alapján.
2. Első lépés reakció: Bevezetés és módosítása a benzolgyűrűnek
Reakció típusa: Az aromás szénhidrogének szubsztitúciós reakciója vagy kapcsolási reakciója.
Konkrét lépések: A katalizátor hatása alatt a kiindulási anyagot megfelelő benzolgyűrűvel reagáló reagensekkel (például fenilboronsav, halogénezett benzol stb.) Reagálják, hogy bevezetjük a benzolgyűrű szerkezetét.
Kémiai egyenlet: A specifikus reagensek és termékek ismeretlen szerkezete miatt az általános képletet itt használják:
Kezdő anyag+benzol gyűrű bevezetése Reagens → Köztes termék 1.
3. második lépésben reakció: Az aminocsoportok bevezetése vagy módosítása
Reakció típusa: Amination reakció vagy amin helyettesítő reakció.
Konkrét lépések: Megfelelő körülmények között reagáljon az 1. köztes terméket aminozó reagensekkel (például aminok, azidok stb.) Az aminocsoportok bevezetésére vagy módosítására.
Kémiai egyenlet:
Köztes termék 1+ Amination reagens → 2. köztes termék
4. harmadik lépésben reakció: hidrogénezési reakció
Reakció típusa: hidrogénezési reakció.
Konkrét lépések: A katalizátorok (például platina, palládium stb.) És a hidrogéngáz hatása alatt a 2. köztes termék hidrogénezhető, hogy dihidroetilén -rúdot vagy analógjait kapjuk.
Kémiai egyenlet:
Közbenső termék 2+ H2 → dihidroetilén -ingot (vagy hasonló)
5. Tisztítás és jellemzés
Tisztítás: Tisztítsa meg a terméket olyan módszerekkel, mint az átkristályosítás és az oszlopkromatográfia.
Jellemzés: Használjon olyan technikákat, mint a tömegspektrometria, az infravörös spektroszkópia és a nukleáris mágneses rezonancia a termék jellemzésére, valamint annak szerkezetének és tisztaságának megerősítéséhez.
DihidroetidiumA (DHE) egy fluoreszcens szonda, amelyet széles körben használnak a biológiai kutatásban. Egyedülálló fluoreszcencia tulajdonságai jelentős előnyöket biztosítanak az intracelluláris reaktív oxigénfajok (különösen a szuperoxid anionok) kimutatására. Az alábbiakban bemutatjuk az etilén -dihidrogén rézök fluoreszcencia tulajdonságainak részletes bevezetését:
Maga a dihidroetilén nem fluoreszcens vegyület, de amikor belép a sejtekbe, akkor intracelluláris szuperoxid anionokkal (O ₂ ⁻) oxidálható, ezáltal etilénré alakítva. Az etilénglikol egy fluoreszcens vegyület, amely kötődik a DNS -hez és az RNS -hez. Ezért, amikor a dihidroetilénglikol etilénglikolgá oxidálódik, akkor kötődik a sejtekben lévő nukleinsavakhoz és erős vörös fluoreszcenciát bocsát ki.
A dihidroetil -rézök fluoreszcencia spektrális tulajdonságai jelentősen megváltoznak az oxidáció előtt és után. Ha nem oxidálódik, akkor a dihidroetil -rés nem bocsát ki fluoreszcenciát. Ha etilén -oxiddá oxidálódik, akkor a maximális gerjesztési hullámhossz általában körülbelül 488 nm vagy 530 nm, és a maximális emissziós hullámhossz körülbelül 610 nm. Ez kompatibilisvé teszi a közös fluoreszcencia mikroszkópok vagy áramlási citométerek szűrőrendszereivel, megkönnyítve a fluoreszcencia képalkotást és a kvantitatív elemzést.
A dihidroetil -szulfát fluoreszcencia intenzitása pozitív korrelációban van az intracelluláris szuperoxid anionok szintjével. Amikor az intracelluláris szuperoxid -anionok koncentrációja növekszik, akkor a dihidroetilén -diamin több oxidálódik etilén -diaminré, amely kötődik a nukleinsavakhoz és erősebb fluoreszcencia jeleket bocsát ki. Ezért a dihidroetilén -diamin fluoreszcencia intenzitásának kimutatásával az intracelluláris szuperoxid anionok szintje közvetett módon tükröződik.
A dihidroetilén -glikol és a nukleinsav kombinációjával képződött fluoreszcens komplex nagy stabilitással rendelkezik, és nem könnyen fehéríthető vagy enzimatikusan hidrolizálódik. Ez a dihidroetilén -glikol jó fluoreszcencia stabilitását eredményezi hosszú - képalkotó vagy folyamatos megfigyelési kísérletekben, amelyek előnyösek az intracelluláris szuperoxid -anionok dinamikus változásainak pontos értékeléséhez.
Az etilén -diamin fluoreszcencia tulajdonságainak felhasználásával a kutatók olyan képalkotási technikákat alkalmazhatnak, mint például a fluoreszcencia mikroszkópia vagy az áramlási citometria az intracelluláris szuperoxid anionok szintjének monitorozására és elemzésére a valós- idő alatt. Ennek a módszernek a nagy érzékenység, a specifitás és a nagy- áteresztőképesség előnyei vannak, amelyek hatékony eszközt biztosítanak a reaktív oxigénfajok mechanizmusainak feltárására a sejtek fiziológiájában és patológiájában.
A dihidroetidium (dihidroetidium, DHE) valóban egy - áteresztő kék fluoreszcens szonda sejt, amelyet elsősorban a szuperoxid-radikális anion (O2-) kimutatására használnak a sejtekben. Az alábbiakban a detektálás és alkalmazási esetek alapelve a biológiai kutatásban:
Észlelési elv
A DHE dehidrogénezhető az intracelluláris szuperoxid anionnal, hogy etidiumot (pl. Etidium -bromid) termeljen, miután az élő sejtek lenyelik. Az etidium kötődik az RNS -hez vagy a DNS -hez, hogy vörös fluoreszcenciát hozzon létre. Ha az intracelluláris szuperoxid anion szintje magasabb, akkor több etidiumot termelnek, és a vörös fluoreszcencia erősebb; Ezzel szemben gyengébb. Ez lehetővé teszi a szuperoxid anionszintek DHE -vel történő kimutatását. Ugyanakkor a DHE maga a citoplazmában kék színű, amíg oxidálódik, majd beillesztik a sejt DNS -be, és a magot fényes fluoreszcens vörösre festi.
Alkalmazási példák
A ROS -termelés kimutatása a májszövetben: A májszövet -metszeteket elkészítjük és inkubáltuk DHE -vel. A metszeteket ezután fluoreszcencia mikroszkóppal figyeljük meg, és a DHE - pozitív sejtek százalékát kvantitatív morfometriai elemzéssel számolják a ROS (reaktív oxigénfajok) termelésének felmérésére.
Az antioxidáns enzimek és a CD 34+ sejtek glutation redox státusának változásainak feltárására hypoxic és normoxikus állapotokban: ebben a tanulmányban az O2 szuperoxid - DHE-vel jelölték, majd az UP-Flow-val megvizsgálták. Az eredmények azt mutatták, hogy az oxigéntartalom hatással volt a szuperoxid és a peroxid képződésére, magasabb peroxid -termelés normál állapotban.
A fenti alapelvek és alkalmazási esetek azt mutatják, hogy a DHE, mint szuperoxid anion fluoreszcens szonda, széles körű alkalmazásokkal rendelkezik a biológiai kutatás területén. Nemcsak a sejtekben az oxidatív stressz szintjének felmérésére használható, hanem fontos alapot nyújt a betegségek mechanizmusához és az antioxidáns gyógyszerek kialakulásához.
Határok a kutatásban
► A radioaktív - jelölt szondák tervezése
A szuperoxid in vivo dinamikus követésének lehetővé tételéhez a kutatók egy ¹c - jelölt DHE származékot fejlesztettek ki. A szerkezeti módosítások minimalizálásával (a brómatomot csak a benzolgyűrűnél bevezetve) a DHE kémiai és biológiai tulajdonságait megőrizték. A kedvtelésből tartott képalkotás azt mutatta, hogy ez a szonda négyszeresen magasabb felvételt mutatott az ischaemiás miokardiumban az egészséges szövetekhez képest, szignifikáns korrelációt mutatva a DHE fluoreszcencia intenzitással (r =0.92, P, P, P.<0.001), thereby providing a novel tool for early diagnosis of cardiovascular diseases.
► A mitokondriumok fejlesztése - célzott szondák
A mitokondriális szuperoxid -kimutatás szükségességének kezelése érdekében a kutatók szintetizálták a Mitosox Red -et (a mitokondriumok - lokalizált analógja). Ez a szonda a mitokondriumokat egy trifenil -foszfincsoporton keresztül célozza meg, oxidációs termékével narancssárga - piros fluoreszcencia (510/580 nm). A Parkinson -kórmodellekben a Mitosox Red kimutatása azt mutatta, hogy a mitokondriális szuperoxid -koncentráció a lényegi nigra dopaminerg idegsejtekben ötszörösére emelkedett a normál szinthez képest, korábban megjelenve, mint az apoptotikus markerek. Ez biomarkeret biztosít a neurodegeneratív betegségek korai beavatkozásához.
Népszerű tags: dihidroethidium CAS 104821-25-2, Szállítók, gyártók, gyár, nagykereskedelem, vétel, ár, ömlesztett, eladó, eladó