BIS-TRIS puffer CAS 6976-37-0

Ez egy hatékony biológiai puffer, amelynek hatékony pH-pufferelési tartománya 5,8-7,2 és pKa értéke 6,5 (25 fok). A biokémiai kísérletekben számos biomolekula, például fehérjék és nukleinsavak nagyon érzékenyek a pH-értékekre, és a pH-érték kis változásai is befolyásolhatják szerkezetüket és működésüket. A BIS-TRIS stabilizálni tudja az oldat pH-értékét ezen a pH-tartományon belül, stabil környezetet biztosítva a biokémiai reakciókhoz. A fehérjeleválasztás és -tisztítás során a fehérje természetes konformációja megtartható, így megelőzhető a pH-változások miatti denaturáció vagy kicsapódás.

Például a fehérjetisztítási technikákban, mint az ioncserélő kromatográfia és az affinitáskromatográfia,BIS-TRIS pufferbiztosíthatja, hogy a fehérjék és a kromatográfiás közeg közötti kölcsönhatás stabil pH-körülmények között menjen végbe, ezáltal javítva a tisztítás hatékonyságát és tisztaságát.

Az enzimaktivitási vizsgálatok során az enzimaktivitás gyakran egy adott pH-környezettől függ. A reakciórendszer pH-értéke pontosan szabályozható, hogy az enzim optimális pH-körülmények között katalitikus aktivitást fejtsen ki, és ezáltal pontosan mérje az enzim aktivitását. Ennek nagy jelentősége van az enzimek tulajdonságainak, hatásmechanizmusainak tanulmányozásában, enzimkészítmények fejlesztésében.

A BIS-TRIS képes különböző fémionokkal koordinálni, és stabil komplexeket képezni, mint pl. Zn ² ⁺ - BIS-TRIS, Mn ² ⁺ - BIS-TRIS stb. Ezek a fémion komplexek gyakran fontos szerepet játszanak a fémek szerkezeti elemzésében, a biomolekulák szerkezetének és működésének vizsgálatában. kofaktorokként részt vesznek a fehérjék aktív központjainak kialakításában. A BIS-TRIS fémionokkal való koordinálásával a fehérje-fémion-komplexek szerkezete stabilizálható, ami megkönnyíti az olyan technikák alkalmazását, mint a röntgenkrisztallográfia és a mágneses magrezonancia (NMR) szerkezeti elemzéshez.

Például bizonyos cinktartalmú enzimek aktív központjai cinkionokat igényelnek katalitikus aktivitásuk fenntartásához, a BIS{0}}TRIS Zn ² ⁺ komplexek pedig stabil szerkezeti környezetet biztosíthatnak ezeknek az enzimeknek, ami segít a háromdimenziós szerkezetük pontos elemzésében.

A nukleinsavkutatásban, például a DNS-szekvenálásban, a fémionok is részt vehetnek a nukleinsavak hajtogatásában és funkcionális szabályozásában. A BIS-TRIS és a fémionok közötti koordináció szabályozhatja a nukleinsavak helyi környezetét, befolyásolva a nukleinsavak és a fehérjék, a kis molekulák stb. közötti kölcsönhatásait, hatékony eszközt biztosítva a nukleinsavak szerkezetének és működésének alapos-kutatásához.

A BIS-TRIS-nek fontos alkalmazásai vannak a fehérjeelektroforézises kísérletekben. Az SDS-PAGE (nátrium-dodecil-szulfát poliakrilamid gélelektroforézis) és a natív PAGE (nem denaturáló poliakrilamid gélelektroforézis) általános fehérjeelektroforézis technikák.BIS-TRIS puffergyakran használják elektroforézispuffer előállítására, hogy az elektroforézis során fenntartsák az oldat pH-stabilitását. Az SDS-PAGE-ban a fehérjék denaturálódnak és negatív töltésűek SDS-t és merkaptoetanolt tartalmazó mintapufferben, majd molekulaméretük szerint elválasztják poliakrilamid gélen.

Biztosítani tudja az elektroforézis puffer pH-értékének stabilitását, lehetővé téve a fehérjék elvárt módon történő vándorlását elektromos térben, ezáltal pontosan elválasztja a különböző molekulatömegű fehérjéket és kimutatja relatív molekulatömegüket.

A Natív PAGE-ban a fehérjék megtartják természetes konformációjukat az elektroforetikus elválasztáshoz. Használatával megelőzhető a pH-változások miatti fehérjedenaturáció, megőrizhető a fehérjék természetes aktivitása és konformációs információja, valamint segíthet a fehérjék természetes állapotának és kölcsönhatásainak tanulmányozásában.

A Western-blot egy fontos kísérleti technika, amelyet a célfehérjék expressziós szintjének kimutatására használnak. A Bis Tris propán puffert gyakran használják fehérje transzport pufferként immunblot kísérletekben.

A fehérje gélről a membránra történő átvitele során a Bis Tris propán puffer stabil pH-környezetet tud fenntartani, biztosítva, hogy a fehérje megfelelő konformációval és töltési állapotban kerüljön a membránba. Ez döntő fontosságú a későbbi antitest-kötődéshez és a jelek detektálásához.

Ha a fehérjék denaturálódnak vagy konformációs változásokon mennek keresztül az átviteli folyamat során, ez azt eredményezheti, hogy az antitestek nem képesek pontosan felismerni a célfehérjét, ami befolyásolja a kísérleti eredmények pontosságát. Ezért a Bis Tris propán puffer döntő szerepet játszik az immunblot kísérletekben, segítve a kísérletek érzékenységének és megbízhatóságának javítását.

A sejttenyésztés fontos technológia az orvosbiológiai kutatásokban, és a sejttenyésztő tápközeg pH-értéke jelentős hatással van a sejtnövekedésre és az anyagcserére. A BIS-TRIS propánpuffer sejttenyésztő táptalaj készítésére használható, hogy a sejttenyésztési folyamat során stabil pH-értéket tartsunk fenn.

A különböző típusú sejteknek eltérő pH-igényük van, de általában a fiziológiás pH-hoz (körülbelül 7,2-7,4) közeli környezetben kell növekedniük.

A BIS-TRIS propánpuffer képes pufferelni a táptalaj pH-változásait a sejttenyésztés során, megakadályozza a pH-ingadozást, amelyet az anyagcseretermékek felhalmozódása, a gázcsere és más tényezők okoznak, és stabil növekedési környezetet biztosít a sejtek számára. Ennek nagy jelentősége van a sejtek normál növekedése, proliferációja és funkcionális expressziója szempontjából, elősegítve a sejttenyésztés sikerességének és a kísérleti eredmények megbízhatóságának javítását.

A nukleinsav-elektroforézis egy általánosan használt módszer a célnukleinsavak hosszának és koncentrációjának kimutatására, beleértve a DNS- és RNS-elektroforézist. Alkalmas nukleinsav elektroforézis kísérletekhez, képes fenntartani az elektroforézis puffer pH-stabilitását.

A nukleinsav-elektroforézis során a nukleinsavmolekulák elektromos tér hatására vándorolnak méretük és töltési tulajdonságaik alapján.

Biztosítani tudja az oldat pH-értékének stabilitását az elektroforézis során, lehetővé téve a nukleinsavmolekulák elvárt módon történő vándorlását, ezáltal pontosan elválasztja a különböző hosszúságú nukleinsav-fragmenseket, és detektálja azok koncentrációját. Ez nagy jelentőséggel bír az olyan kutatások szempontjából, mint a génklónozás, a génexpresszió-analízis és a nukleinsav-szekvenálás.

A BIS-TRIS a kreatin-kináz kimutatására is használható. A kreatin-kináz egy fontos enzim, amely döntő szerepet játszik az izomenergia-anyagcserében. Tevékenységének meghatározása nagy jelentőséggel bír az izombetegségek diagnosztizálásában és a sportsérülések értékelésében. A kreatin-kináz kimutatási kísérletében a reakciórendszer pH-stabilitása fenntartható annak biztosítására, hogy az enzim optimális pH-körülmények között katalitikus aktivitást fejtsen ki. A pH-érték precíz szabályozásával javítható a kreatin-kináz aktivitásmérés pontossága és megbízhatósága, ami erős támogatást nyújt a klinikai diagnózishoz és kutatáshoz.

A BIS{0}}TRIS a hemoglobin kutatásában és alkalmazásában is fontos szerepet játszik. A hemoglobin szétválási folyamata során megőrizhető stabilitása és aktivitása, így megelőzhető a pH-változások miatti denaturáció vagy aggregáció. Ennek nagy jelentősége van a hemoglobin tisztítása és szerkezeti kutatása szempontjából.

A BIS-TRIS hatékonyan védi a hemoglobint a fagyasztva{1}}szárítási folyamat során. A fagyasztva szárítás egy általánosan használt módszer a biológiai termékek tartósítására, de a fehérjék károsodhatnak a fagyasztási és szárítási folyamat során. Stabil környezetet biztosíthat a hemoglobin számára a fagyasztva{4}}szárítási folyamat során, csökkentheti a fehérjék denaturálódását és inaktivációját, valamint javíthatja a hemoglobin aktivitását és stabilitását a fagyasztva{5}}szárítás után.

Az IEF (izoelektromos fókuszáló elektroforézis) és a 2-D gélelektroforézis gyakori technikák a proteomikai kutatásokban, melyeket összetett fehérjekeverékek elkülönítésére és elemzésére használnak. A BIS-TRIS katód-elektrolitként használható IEF/2-D gélelektroforézishez.

Az IEF folyamat során a fehérjék vándorolnak és izoelektromos pontjukon alapuló pH-gradiensben fókuszálnak. A BIS-TRIS katolit képes fenntartani az elektroforézis puffer pH-stabilitását, biztosítva, hogy a fehérjék pontosan vándorolhassanak az izoelektromos pontjukra az izoelektromos fókuszálási folyamat során. A 2-D gélelektroforézisben azBIS-TRIS pufferemellett segít javítani a fehérjék elválasztási hatását és felbontását, és kiváló minőségű adatokat biztosít{0}}a proteomikai kutatásokhoz.