Sziasztok, tudományrajongó kollégák! Beszállítóként aIPTG por, Az utóbbi időben rengeteg kérdést kapok azzal kapcsolatban, hogy ez a remek kis por hogyan befolyásolja a fehérje expresszióját különböző tápközeg-összetételekben. Úgyhogy úgy gondoltam, mélyen belemerülök ebbe a témába, és megosztom, amit tanultam.
Iptg por
Termékkód: BM-2-5-133
Név: Iptg
CAS-szám: 367-93-1
MF: C9H18O5S
HS kód: 29389090
MW: 238,3
EINECS sz.: 206-703-0
Gyártó: BLOOM TECH Wuxi Factory
Analízis: HPLC, LC-MS, HNMR
Fő piac: USA, Ausztrália, Brazília, Japán, Németország, Indonézia, Egyesült Királyság, Új-Zéland, Kanada stb.
Technológiai támogatás: K+F Oszt.-4
biztosítunkIPTG por, kérjük, látogassa meg a következő webhelyet a részletes specifikációkért és a termékinformációkért.
Termék:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/api-researching-only/iptg-powder-cas-367-93-1.html
Először is beszéljünk arról, hogy mi az IPTG por. Az IPTG vagy izopropil-β-D-1-tiogalaktopiranozid egy jól ismert induktor a molekuláris biológiában. A lac operon irányítása alatt álló gének expressziójának bekapcsolására szolgál. Ha IPTG-t ad a tenyészetéhez, az az allolaktóz, egy természetes induktor hatását utánozza, és a lac-represszorhoz kötődik. Ez a kötődés konformációs változást okoz a represszorban, megakadályozva, hogy a DNS operátorrégiójához kötődjön. Ennek eredményeként az RNS-polimeráz szabadon átírhatja a géneket az operátor után, ami fehérje expressziójához vezet.
LB közepes
Az LB (Luria - Bertani) táptalaj az egyik leggyakrabban használt táptalaj a mikrobiológiában. Tápanyagokban gazdag, és kiváló környezetet biztosít a baktériumok növekedéséhez. Ha az IPTG-t LB-tápközegben használja, általában elég jó fehérjeexpresszió-indukció érhető el. A baktériumok rengeteg erőforrással rendelkeznek a fehérjék növekedéséhez és szintetizálásához, miután az IPTG kiváltja a génexpressziót.
Van azonban néhány hátránya. Néha a baktériumok túl gyorsan szaporodhatnak LB tápközegben, és a nagy sűrűségű tenyésztés olyan problémákhoz vezethet, mint az oxigénhiány és a mérgező melléktermékek felhalmozódása. Ez befolyásolhatja az expresszált fehérje minőségét és mennyiségét. Ezenkívül az LB-ben található gazdag tápanyagok néha arra késztethetik a baktériumokat, hogy a célfehérjével együtt sok más fehérjét is termeljenek, így a tisztítási folyamat nagyobb kihívást jelent.
M9 Minimális Közepes
Az M9 minimális táptalaj az LB-hez képest határozottabb táptalaj. Csak a baktériumok növekedéséhez nélkülözhetetlen tápanyagokat tartalmazza, például sókat, szénforrást (általában glükózt) és nitrogénforrást. Ha az IPTG-t M9 minimális tápközegben használja, a fehérje expressziója szigorúbban szabályozható.
Mivel a baktériumok kevesebb erőforrással rendelkeznek az M9-ben, lassabban szaporodnak. Ez a lassabb növekedési ütem bizonyos fehérjék számára előnyös lehet, különösen azoknál, amelyek nehezen expresszálódnak, vagy hajlamosak a hibás hajtogatásra. A baktériumoknak több idejük van a fehérjék helyes hajtogatására, ami nagyobb hozamot eredményez a megfelelően hajtogatott és funkcionális fehérjékből. Azonban, mivel a növekedés lassabb, hosszabb ideig tarthat az optimális sejtsűrűség elérése az indukcióhoz, és a teljes fehérjehozam alacsonyabb lehet az LB táptalajhoz képest.
Auto - Indukciós közeg
Az autoindukciós közegek viszonylag új fejlesztésnek számítanak ezen a területen. Ezeket a tápközegeket úgy tervezték, hogy a baktériumok növekedési ciklusa során a megfelelő időpontban automatikusan indukálják a fehérje expresszióját. Szénforrások, például glükóz és laktóz keverékét tartalmazzák.
A növekedési szakasz elején a baktériumok elfogyasztják a glükózt, ami elnyomja a lac operont. Ahogy a glükóz kimerül, a baktériumok elkezdik használni a laktózt. A laktóz az IPTG-hez hasonlóan természetes induktorként működhet. Ezenkívül még hozzáadhat egy kis mennyiségű IPTG-t az indukció fokozására.
Az IPTG autoindukciós közegben való használatának előnye, hogy leegyszerűsíti az indukciós folyamatot. Nem kell figyelnie a sejtsűrűséget, és nem kell a megfelelő időben hozzáadnia IPTG-t. Ezenkívül az autoindukciós tápközeg néha magasabb fehérjehozamhoz és jobb fehérjeminőséghez vezethet a hagyományos táptalajokhoz képest.
A média összetételének hatása az IPTG koncentrációra
A fehérjeexpresszióhoz szükséges IPTG optimális koncentrációja a táptalaj összetételétől függően változhat. LB-tápközegben a maximális indukció eléréséhez viszonylag magas IPTG-koncentrációra lehet szükség (általában körülbelül 0,1-1 mM). Ennek az az oka, hogy az LB-ben gazdag tápanyagok bizonyos mértékig megzavarhatják az IPTG kötődését a lac-represszorhoz.
M9 minimális tápközegben az IPTG alacsonyabb koncentrációja (körülbelül 0,01-0,1 mM) elegendő lehet. Az M9 egyszerűbb környezete lehetővé teszi az IPTG hatékonyabb működését. Az autoindukciós tápközegeknél a szükséges IPTG koncentráció általában még alacsonyabb, mivel a tápközegben lévő laktóz is hozzájárul az indukcióhoz.
Az IPTG összehasonlítása más induktorokkal
Vannak más induktorok is a piacon, de az IPTG-nek van néhány egyedi előnye. Például a laktóz természetes induktor, de a baktériumok metabolizálhatják. Ez azt jelenti, hogy a tápközeg laktózkoncentrációja idővel változhat, ami megnehezíti az indukciós folyamat pontos szabályozását. Az IPTG-t viszont a baktériumok nem metabolizálják, így koncentrációja viszonylag stabil marad a tápközegben.
Egy másik induktor az arabinóz, amelyet az ara operon irányítása alatt álló gének indukálására használnak. Az ara operon azonban más szabályozó mechanizmussal rendelkezik, mint a lac operon. Az IPTG-t kifejezetten a lac operonhoz tervezték, amely az egyik legszélesebb körben használt fehérjeexpressziós rendszer.
Ha más vegyi termékek is érdeklik kutatásaihoz, mi is kínálunkPhenibut HCL por 25kg,Kokarboxiláz CAS 154 - 87 - 0, ésDoxiciklin-hiklát por CAS 24390 - 14 - 5. Ezek a termékek különféle kutatási alkalmazásokban hasznosak lehetnek.
Következtetés
Összefoglalva, az IPTG por fehérjeexpresszióra gyakorolt hatását nagymértékben befolyásolja a táptalaj összetétele. A különböző tápközegek különböző előnyöket és hátrányokat kínálnak, és a táptalaj kiválasztása az expresszálni kívánt fehérjétől és a kísérleti követelményektől függ. Függetlenül attól, hogy a klasszikus LB táptalajt, a definiáltabb M9 minimális táptalajt vagy az innovatív autoindukciós táptalajt használja, az IPTG döntő szerepet játszhat a fehérjeexpresszió kiváltásában.
Ha a kiváló minőségű IPTG por vagy az általam említett egyéb termékek piacán keres, ne habozzon kapcsolatba lépni a vásárlással. Azért vagyunk itt, hogy a legjobb termékeket kínáljuk, és támogatást nyújtsunk kutatásaihoz.
Hivatkozások
Studier, FW (2005). Fehérjetermelés autoindukcióval nagy sűrűségű rázókultúrákban. Protein Expression and Purification, 41(1), 207-234.
Sambrook, J. és Russell, DW (2001). Molekuláris klónozás: laboratóriumi kézikönyv. Cold Spring Harbor Laboratory Press.
Baneyx, F. (1999). Rekombináns fehérje expressziója Escherichia coliban. Biotechnology Advances, 17(4), 447-496.